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pet-28b载体lacI缺失两个碱基会导致什么结果
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| 在用pet-28b载体和BL21(DE3)宿主菌构建工程菌之后,测序发现pet-28b质粒上lacI基因缺失了两个碱基,这与我的目的蛋白不表达有关系么? |
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表达载体构建 碱基突变 缺失 原因
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gyesang
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
574759350: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-12-09 16:56:08
574759350: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-12-09 16:56:08
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更正我上面错误的说法, 表达菌株BL21(DE3)上带有lacI基因,其表达的LacI蛋白在非诱导的条件下,既可以与T7 RNA polymerase前的lac UV5启动子后的operator O结合,也可以与pET28a载体T7启动子后的Operator O结合,从而在非诱导情况下阻遏目的基因表达 虽然pET-28a载体的LacI发生碱基缺失突变,由于细菌基因组本身仍能表达正常的LacI,所以总的来说在非诱导情况下仍能阻遏蛋白表达 这两个碱基的缺失与你的蛋白不表达无关 |

5楼2013-12-09 14:35:21
gyesang
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2楼2013-12-09 11:30:35
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4楼2013-12-09 12:32:28













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