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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 摇瓶污染杂菌
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gym216

新虫 (初入文坛)

[求助] 摇瓶污染杂菌

我培养食用菌丝状真菌，摇瓶培养一周后镜检1600倍下有疑似球菌或杂质颗粒振动，640倍下很难看到。但是取样后接平板划线培养无杂菌菌落，接营养肉汤也不变混浊。接发酵罐后菌种可以生长，但是有杂菌很摇瓶情况一样，发酵罐随着时间加长会酸败

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1楼 2013-11-30 07:42:01
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cymhxdrl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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gym216: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-30 08:49:56
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-11-30 11:15:21
应该是感染球菌了，可以在固体培养基上添加些抗生素，重新分离纯化后，再做发酵实验。
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2楼2013-11-30 08:22:50
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gym216

新虫 (初入文坛)
请问一下，这种感染用营养肉汤培养液检测不混浊，说不说得通

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3楼2013-11-30 08:48:42
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助！ 2013-11-30 11:15:34
首先确定你的原始菌株是否污染杂菌，如果是重新分离纯化。确定菌株不带菌后再检测是操作过程还是在摇瓶的过程中带入的杂菌，可以将摇瓶培养基不接种和接种的同时上摇床培养，如果都染菌，说明是摇瓶过程中带的菌，可以加厚纱布，如果用的是硅胶塞可以在外面加几层纱布。如果不接种的没有染菌而接种的染菌了，说明是操作过程中带的菌，要严格无菌操作，无菌室要好好的灭菌。
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4楼2013-11-30 08:52:33
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liurechen

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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个人觉得不是染菌。1600倍使用的16×100的显微镜，这应该是油镜吧，做出的片子不应该看到震动的颗粒，除非是香柏油里有杂质。把你的种子蠢话一下试试吧。
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相争两蜗角，所得一牛毛。 且灭嗔中火，休磨笑里刀。
5楼2013-11-30 12:26:29
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ninor

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很难说是否染杂菌，建议多次反复纯化并使用适当的抗生素在平板内。
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6楼2013-11-30 17:51:12
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gym216

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liurechen at 2013-11-30 12:26:29
个人觉得不是染菌。1600倍使用的16×100的显微镜，这应该是油镜吧，做出的片子不应该看到震动的颗粒，除非是香柏油里有杂质。把你的种子蠢话一下试试吧。

等摇瓶好了我再附个照片上来，我的片子没有经过固定，就是滴点发酵液和一滴美兰染液然后盖上盖玻片，直接观看。盖玻片买回来就是受潮粘在一起，盖玻片都花了，也不知道用不用洗洗？你们玻璃片一般怎么清洗
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7楼2013-11-30 20:27:32
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是小颗粒的？建议你在罐子空气系统检测下，菌种还是做下分离纯化吧
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8楼2013-12-02 10:33:44
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liurechen

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by gym216 at 2013-11-30 20:27:32
等摇瓶好了我再附个照片上来，我的片子没有经过固定，就是滴点发酵液和一滴美兰染液然后盖上盖玻片，直接观看。盖玻片买回来就是受潮粘在一起，盖玻片都花了，也不知道用不用洗洗？你们玻璃片一般怎么清洗...

那就是看的活片了，有震动颗粒很正常，一般都是培养基里的东西，这种情况下细菌你是几乎不可能看到的，除非染的是酵母菌。另外，盖玻片上可能会有一些结晶型的花纹，使用前可以用水冲洗一下比较好，以免影响判断。
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相争两蜗角，所得一牛毛。 且灭嗔中火，休磨笑里刀。
9楼2013-12-03 13:18:08
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gym216

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by liurechen at 2013-12-03 13:18:08
那就是看的活片了，有震动颗粒很正常，一般都是培养基里的东西，这种情况下细菌你是几乎不可能看到的，除非染的是酵母菌。另外，盖玻片上可能会有一些结晶型的花纹，使用前可以用水冲洗一下比较好，以免影响判断。...

请问怎么确认有无细菌感染？取样接入普通营养肉汤培养液培养2天，是不是不混浊就无细菌感染？

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10楼2013-12-03 19:53:43
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