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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 紫外法测定脂肪氧化酶活性 底物配置浑浊 怎么办？？
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hongri1130

铁虫 (小有名气)

[求助] 紫外法测定脂肪氧化酶活性 底物配置浑浊 怎么办？？ 已有1人参与

实验用紫外分光光度法测定脂肪氧化酶的活性，用234nm处的吸光值表示脂肪氧化酶的活性。
底物配置时候出现浑浊情况，该如何处理？
具体方法如下：将 0.25 mL Tween 20 分散于 10 mL pH 9.0 的 0.2 mol/L 的硼酸盐缓冲液中，摇动下逐滴加入 0.27 mL 亚油酸，充分混合，加入1mol/L 的氢氧化钠溶液1mL 使体系澄清，用 1mol/L 的盐酸调 pH 至 9.0，然后用上述缓冲液稀释到 500 mL。

按照方法氢氧化钠轻轻摇动会使溶液变得澄清，但是我在操作过程中采用此法不能使溶液变得澄清，油没有完全反应，还是有油漂浮在溶液表面，而且溶液容易变得浑浊。改用慢慢滴加氢氧化钠也还是无法使溶液澄清。

我该如何处理？？？
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1楼 2013-11-07 20:07:40
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阿月浑子V5

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
氢氧化钠坏了？实验室不有dancer嘛，试试这个，它可比手晃强多了
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伤痕，是男人的勋章。
2楼2013-11-07 22:32:39
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阿月浑子V5

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

Tween20作为这个表面活性剂来分散油相，为嘛还要氢氧化钠？难道Tween20只能分散成乳液？这个不太懂。
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伤痕，是男人的勋章。
3楼2013-11-07 22:37:10
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pig李

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也在准备测定脂肪氧化酶，还没有动手开始，文献说浑浊是因为PH值不对，也许你的实验条件和文献里面的不同，所以即使你调到了那个PH，也还是浑浊的，所以个人认为你可以尝试往里面加NaOH,不用刻意加多少，只要澄清了就好
还有就是不溶的问题，我看文献有加乙醇的，之后又把乙醇抽提出去了，就是为了增加亚油酸的溶解性，我还没有试过，你刻意试试啦
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4楼2015-09-19 10:32:57
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雯雯雯雯雯

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by pig李 at 2015-09-19 10:32:57
我也在准备测定脂肪氧化酶，还没有动手开始，文献说浑浊是因为PH值不对，也许你的实验条件和文献里面的不同，所以即使你调到了那个PH，也还是浑浊的，所以个人认为你可以尝试往里面加NaOH,不用刻意加多少，只要澄清 ...

您好，我想问一下分光光的法测脂肪氧化酶测出来结果大概是什么情况，我测面粉中的脂肪氧化酶，前一分钟吸光值上升的比较明显，后面上升就变慢了，3分钟基本就不变了
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5楼2018-01-24 15:22:30
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