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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 材料表征测试 » 生物材料在做电镜时的固定方法
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doukirdou

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

[求助] 生物材料在做电镜时的固定方法

各位大神，小女子最近要做自己合成的抗菌材料的电镜实验。
我的材料是直接用粉末压成片，然后拿去养菌，现在要看菌在材料表面的形态，但由于材料在任何溶剂中都会崩解散开，因而想求助各位大神有木有一种固定方法是可以不用溶剂的？

生物材料在做电镜时的固定方法


[ Last edited by doukirdou on 2014-12-23 at 19:52 ]
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春水初生，春林初盛，春风十里不如你。
1楼 2013-10-31 00:17:35
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freefire85

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、先离心
2、用戊二醛2.5%的戊二醛在4度冰箱固定1.5个小时
3、用pH6.8的PBS冲洗三次，每次10分钟
4、用50%，70%，80%，90%乙醇梯度脱水，每次10-15分钟
5、用100%的乙醇脱水三次，每次10-15分钟
6、100%乙醇：乙酸异戊酯=1：1和纯乙酸异戊酯置换，每次15分钟
7、置换后的样品放入滤纸上，在干燥器中保持8小时以上
赞一下 回复此楼
8楼2013-11-02 10:43:47
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pipibaby

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
doukirdou: 金币+5 2013-11-03 00:50:38
你的材料溶解于乙醇？不能逐步脱水？
但我猜想你的材料在水中是不溶解的吧
那你可以把你养菌后的材料用PBS 洗干净，然后再戊二醛里面固定细菌，晾干至完全没有水分，就可以做电镜了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-10-31 01:49:08
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

优秀超版优秀版主优秀区长

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
呵呵，用粉末压片就是麻烦一些

你可以试试直接用多聚甲醛熏蒸的方法，印象中曾经看过类似的文章，好像就是中文的
赞一下(1人) 回复此楼
能攻心则反侧自消，从古知兵非好战；不审势即宽严皆误，后来治蜀要深思
3楼2013-10-31 10:03:41
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chase.lg

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pipibaby at 2013-10-31 01:49:08
你的材料溶解于乙醇？不能逐步脱水？
但我猜想你的材料在水中是不溶解的吧
那你可以把你养菌后的材料用PBS 洗干净，然后再戊二醛里面固定细菌，晾干至完全没有水分，就可以做电镜了

不是啊，是在溶液中会崩解散开。
赞一下 回复此楼
实验需要耐性
4楼2013-10-31 17:43:47
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