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_xiaoniu_木虫 (小有名气)
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细胞电镜制样梯度乙醇脱水后可以直接冷冻干燥吗？
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| 在细胞电镜制样过程中，得到细胞后用戊二醛固定及梯度乙醇脱水后，直接在100%乙醇中冷冻干燥可以吗？看到有人说要用乙酸异戊酯等易挥发溶剂置换后干燥，弱弱的问一句，乙醇不就是易挥发的么？还有锇酸和电镜观察之前的喷金处理有什么不同，是不是锇酸固定后就不用喷金了，喷金的话就不用用锇酸固定了呢？本人新手，欢迎各位前辈指教! |
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【答案】应助回帖
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（1）细胞用戊二醛固定及梯度乙醇脱水后，是否冷冻干燥，要看用哪种电镜观察： 如果用扫描电镜观察，一般要冷冻干燥，这是在抽真空状态下观察样品，必须完全干燥样品； 如果用透射电镜观察，则不需要冷冻干燥的，因为后续还要用树脂渗透、包埋等处理。 （2）细胞一般不导电，所以在用扫描电镜观察时用到喷金处理，增加样品导电性和分辨性能； 而透射电镜样品处理中，包埋之后、要有切片、染色（枸橼酸铅和醋酸铀负染）等步骤，则不需要喷金处理，当然，也有不染色的，细胞颜色淡一些，影响观察，不过对于做EDX有利。 （3）锇酸一般是后固定用的，看要求了。 |
2楼2013-04-21 12:08:40
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3楼2013-04-21 12:49:04
_xiaoniu_
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