应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 材料表征测试 » 细胞电镜制样梯度乙醇脱水后可以直接冷冻干燥吗？
111/2返回列表12下一页
查看: 6441  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

_xiaoniu_

木虫 (小有名气)

[求助] 细胞电镜制样梯度乙醇脱水后可以直接冷冻干燥吗？

在细胞电镜制样过程中，得到细胞后用戊二醛固定及梯度乙醇脱水后，直接在100%乙醇中冷冻干燥可以吗？看到有人说要用乙酸异戊酯等易挥发溶剂置换后干燥，弱弱的问一句，乙醇不就是易挥发的么？还有锇酸和电镜观察之前的喷金处理有什么不同，是不是锇酸固定后就不用喷金了，喷金的话就不用用锇酸固定了呢？本人新手，欢迎各位前辈指教!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

科技

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-20 17:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lark001

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+2, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-04-21 12:31:57
_xiaoniu_: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-04-22 20:27:45
（1）细胞用戊二醛固定及梯度乙醇脱水后，是否冷冻干燥，要看用哪种电镜观察：
        如果用扫描电镜观察，一般要冷冻干燥，这是在抽真空状态下观察样品，必须完全干燥样品；
        如果用透射电镜观察，则不需要冷冻干燥的，因为后续还要用树脂渗透、包埋等处理。
（2）细胞一般不导电，所以在用扫描电镜观察时用到喷金处理，增加样品导电性和分辨性能；
       而透射电镜样品处理中，包埋之后、要有切片、染色（枸橼酸铅和醋酸铀负染）等步骤，则不需要喷金处理，当然，也有不染色的，细胞颜色淡一些，影响观察，不过对于做EDX有利。
  （3）锇酸一般是后固定用的，看要求了。
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-21 12:08:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangkj
3楼2013-04-21 12:49:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

_xiaoniu_

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lark001 at 2013-04-21 12:08:40
（1）细胞用戊二醛固定及梯度乙醇脱水后，是否冷冻干燥，要看用哪种电镜观察：
        如果用扫描电镜观察，一般要冷冻干燥，这是在抽真空状态下观察样品，必须完全干燥样品；
        如果用透射电镜观察，则不 ...

谢谢，准备要用扫描电镜观察，梯度乙醇脱水后，冷冻干燥之前要用叔丁醇或者乙酸异戊酯置换吗？直接在乙醇中冷冻干燥可以吗？
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-21 13:46:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bluern

木虫 (著名写手)

貌似那两种试剂不贵把。要不这么省~~

楼上的回答真好。
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-21 15:13:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bluern

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bluern at 2013-04-21 15:13:18

貌似那两种试剂不贵把。要不这么省~~

楼上的回答真好。


偶想起来，确实那两种物质的味道真要命。no~~
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-21 15:25:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lark001

新虫 (小有名气)
★
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-04-21 18:54:10
引用回帖:
4楼: Originally posted by _xiaoniu_ at 2013-04-21 13:46:14
谢谢，准备要用扫描电镜观察，梯度乙醇脱水后，冷冻干燥之前要用叔丁醇或者乙酸异戊酯置换吗？直接在乙醇中冷冻干燥可以吗？...

一般用梯度乙醇脱水后，要倒掉乙醇的，然后再冷冻干燥。是否用叔丁醇或者乙酸异戊酯置换，没做过，估计这两种物质可以置换出细胞中剩余水分的位置，起到支撑细胞的作用，虫友样品多的话，直接干燥和置换后再干燥不妨都试试，看有没有差别。
赞一下 回复此楼
7楼2013-04-21 15:35:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

_xiaoniu_

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by bluern at 2013-04-21 15:25:14

偶想起来，确实那两种物质的味道真要命。no~~...

倒不是省，之前做的时候直接在乙醇中冷冻干燥，后来看到还需要置换，所以就想问下。
赞一下 回复此楼
8楼2013-04-21 21:39:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

_xiaoniu_

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lark001 at 2013-04-21 15:35:21
一般用梯度乙醇脱水后，要倒掉乙醇的，然后再冷冻干燥。是否用叔丁醇或者乙酸异戊酯置换，没做过，估计这两种物质可以置换出细胞中剩余水分的位置，起到支撑细胞的作用，虫友样品多的话，直接干燥和置换后再干燥不 ...

之前做的时候是这么做的，将纯乙醇倒掉，然后直接冷冻干燥，做出来的结果如图，将内皮细胞是放在硅片上，用戊二醛固定，梯度乙醇脱水然后冷冻干燥后观察，得到的结果如下图，衬底上一片一片的似乎是一层什么东西盖在上面，是铺展的细胞还是别的什么，不知道这是不是制样的问题，还望指教！

网上下载细胞.jpg



cell_m001.jpg



cell_m005.jpg
赞一下 回复此楼
9楼2013-04-21 22:32:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

优遇

金虫 (著名写手)
★
fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-04-23 07:36:39
乙醇的凝固点很低…有没有可能是冷冻干燥不完全呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
行胜于言
10楼2013-04-22 23:55:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 _xiaoniu_ 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:15 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 13:39 by ObVzqQQh1rrE
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:15 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 11:27 by UAIjTRMuUFoj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 mibUvS8DDCwf 2026-09-15 4/200 2026-09-17 06:26 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-17 04:16 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 01:38 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-16 22:26 by Tql5LQhh5rLK
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-16 02:38 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-16 02:35 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:14 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:35 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭