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微笑莫凝汐

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】拟南芥突变体三引物法检测纯合子

在做拟南芥突变体的筛选 有几个问题搞不懂 看了网上说的 查阅文献也没搞懂 还请各位指教一下
1、如何确定T-DNA用哪个引物啊?有好几个LB引物 不知道用哪个  我的是SALK的 并且是Prok2载体的
2、做三引物PCR的时候 是三种引物一起加进去PCR吗  如果是两个两个加的  为什么杂合子会同时出现两条带呢?
3、如何确定T-DNA插入的方向呢?

谢谢各位的回答!不胜感激!
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