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邓满凤

新虫 (初入文坛)

[求助] 急需

有哪位大侠做过磁性纳米颗粒固定化漆酶?为什么我将0.1- 0.25%的戊二醛直接加入到1ml0.5mol/ml的漆酶溶液(包含了5mg的氨基化的二氧化硅)中,在冰箱中固定化12个小时后测酶活回收率怎么只有3%?可以帮忙分析下吗
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邓满凤

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by duruo at 2013-11-01 11:13:56
现在看有几个可能:
1、固载酶含量测定有误差,尤其是固载量很低的情况下,误差就会更大;
2、戊二醛本身对酶活性有影响,这里主要是指酶被戊二醛交联,因此导致的活性降低;
3、酶在固定化后,其最佳催化条件可 ...

听了你的建议后收获很大,我想问下,测定漆酶活力的温度文献上都在25度,pH4.5 左右,如果我要改变测活的温度是提高温度好还是升温好些,或者PH偏酸性好些呢?如果用环氧基对二氧化硅表面进行修饰是不是可以避免戊二醛的使用从而提高活性?但是环氧基与酶上面的氨基基团容易反应吗?反应条件怎么样?
7楼2013-11-01 13:56:46
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2013-11-01 15:40:31
邓满凤(红舟流星代发): 金币+2, 代扣代发金币 2014-03-25 10:52:12
0.5mol/mL ? 笔误吧?
不知道你的操作过程如何

不过将戊二醛直接加入酶的溶液中,应该会造成酶自身的交联,使其失活

先用戊二醛活化二氧化硅,然后加入酶,可能会好些
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
2楼2013-10-29 14:35:21
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邓满凤

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by duruo at 2013-10-29 14:35:21
0.5mol/mL ? 笔误吧?
不知道你的操作过程如何

不过将戊二醛直接加入酶的溶液中,应该会造成酶自身的交联,使其失活

先用戊二醛活化二氧化硅,然后加入酶,可能会好些

请问0.5mg/ml的酶液不行吗?我试过先用戊二醛活化二氧化硅,然后加入酶,但活性收率太低了
3楼2013-10-29 15:15:56
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

优秀超版优秀版主优秀区长

【答案】应助回帖


邓满凤(红舟流星代发): 金币+1, 代扣代发金币 2014-03-25 10:52:19
引用回帖:
3楼: Originally posted by 邓满凤 at 2013-10-29 15:15:56
请问0.5mg/ml的酶液不行吗?我试过先用戊二醛活化二氧化硅,然后加入酶,但活性收率太低了...

呵呵,0.5mg可以,0.5mol就太大了

你是怎么计算活性收率的?最好把整个过程都写出来
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
4楼2013-10-29 15:21:35
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