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| 有哪位大侠做过磁性纳米颗粒固定化漆酶？为什么我将0.1- 0.25%的戊二醛直接加入到1ml0.5mol/ml的漆酶溶液（包含了5mg的氨基化的二氧化硅）中，在冰箱中固定化12个小时后测酶活回收率怎么只有3%？可以帮忙分析下吗 |
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duruo
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4楼2013-10-29 15:21:35
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2楼2013-10-29 14:35:21
3楼2013-10-29 15:15:56
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取6mg氨基活化的磁性二氧化硅纳米颗粒分散到1ml浓度为0.5mg/ml漆酶溶液（用磷酸盐缓冲液配置）中，加入20ul，0.1%的戊二醛，然后将反应混合物置于4℃的恒温摇床上反应13h，其中摇床的转速为150rpm。反应结束时，用磁铁吸住磁性微球，倾去上清液。用磷酸盐缓冲液（0.1M，PH 7）洗涤磁性纳米颗粒，并且记录好每次洗涤的体积，直到上清液检测不到蛋白质为止。将所制备的固定化漆酶保存在磷酸盐缓冲液中。 活性收率=固定上的酶活力/相同量的游离酶的活力 固定化酶的活力是在线测5min ,得到吸光值与时间的关系，算出活力 以前用先交联喜干净后再加酶进行固定化，条件跟上面说的一样，为什么这两种方法测出来的活性收率这么低？真心希望得到你的指导，谢谢！ |
5楼2013-10-31 18:50:45
