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angel901216金虫 (小有名气)
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HPLC总出现倒峰怎么回事
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| 用HPLC分析样品时，330nm出现正常的谱图，530出现的却是倒峰，这是怎么回事呢？ |
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5楼2013-10-29 09:00:12
wjg6670
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暂且不说别的，文献只是参考，你永远无法具有和文献相同的条件。这个你懂得。 既然在530nm处是倒峰说明样本的吸光度小于流动相，那检查流动相，流动相是否有可以产生吸光度的物质，也就是增加背景值的物质，还有你用的流动相溶剂的纯度是否合格，不要只看标签纯度，卖假货的从来不贴假货商标。 那反过来，你的流动相溶剂和文献相同吗，你的色谱柱和文献一致吗，这个你就理解为什么色谱柱出厂每根都要单独出具检测报告，同一厂家生产同批次还有差异。 液相色谱只关心这几个参数，用何种类型色谱柱，流动相配比，检测波长，具体操作参数以实际待测物质检测为准，可能流动相会与文献有差异，但只要分离就好，不能照搬，仪器分析贵在灵活应用。 再者为何不扫描待测物质，通过紫外图谱确定检测波长呢。紫外波长跟溶剂极性、PH等因素相关。 |
4楼2013-10-29 08:06:56
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