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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞免疫荧光固定
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倩女

金虫 (正式写手)

[求助] 细胞免疫荧光固定

细胞免疫荧光固定步骤，一般推荐用4%的多聚甲醛，但是有些细胞在加入多聚甲醛之后就会漂起来，有用甲醇和丙酮固定的，那用甲醇和丙酮固定之后还需要再加入Triton100增加膜通透性吗，会不会对抗体的结合有影响？
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1楼 2013-10-15 20:55:52
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feilinshiji

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
倩女: 金币+5, ★★★很有帮助, 十分感谢 2013-10-16 21:53:05
丙酮：甲醇=3:2，TritonX-100最好加上
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4楼2013-10-16 11:31:30
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daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
倩女: 金币+3, ★有帮助, 谢谢 2013-10-16 21:52:28
我直接用95乙醇固定后，没有加Triton100了。
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2楼2013-10-16 09:01:48
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lionllp

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
倩女: 金币+5, ★★★很有帮助, 多谢 2013-10-16 21:52:48
我用95%的乙醇，提前4°C预冷。室温固定20分钟。之后加不加TritonX100都可以，我做的两种荧光没差别。
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科研路漫漫，与君共相伴！
3楼2013-10-16 09:39:12
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0624410024

金虫 (正式写手)

Begging for knowledge

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
倩女: 金币+3, ★有帮助 2013-10-17 21:49:38
用甲醇后可以不用Triton100了
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每天坚持多一点，以后困难少一点！
5楼2013-10-17 12:58:25
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