| 查看: 1835 | 回复: 11 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
jiaoxiayoulu新虫 (小有名气)
|
[求助]
酵母转化之后表现出抗性，但pcr无法验证出来！求解 已有1人参与
|
|
|
请教各位虫友： 我把工业酿酒酵母制成单倍体后，第一：我将KanMX基因转化进酵母，通过同源置换后敲除了某个基因！筛选后，挑出转化子进行抗G418液体培养，结果表现出抗性（对照组不能抗G418）。 第二 在此基础上我进行了PCR验证 引物分别为 a b c d ,其中a,d分别为被敲除基因的上下游引物；b,c分别为KanMX内部的引物。 我的问题在于 PCR后有ab,cd扩增出的条带（但比预期的条带略大一些），此外 不管怎样P了5,6次就是P不出ad条带（我用未做转化的基因组模板P了ad，结果有条带出现）！ 我现在非常的纳闷，问题不知出在哪里，请求大家帮忙分析分析！ |
回复此楼» 猜你喜欢
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有12人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有3人回复
-
科研孤儿太难了
已经有17人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有19人回复
-
看来今天不会放榜了？
已经有11人回复
-
时间戳又变了
已经有19人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有14人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有13人回复
-
人气不行了
已经有7人回复
-
感觉是下周放榜了
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 酵母表达 转化子PCR验证
已经有9人回复
- 酿酒酵母基因组PCR出了16S的条带
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于毕赤酵母电转后PCR验证问题
已经有20人回复
- 【求助/交流】关于酵母菌落PCR
已经有8人回复
4楼2013-12-14 12:17:54
2楼2013-11-12 19:30:14
dllchina
木虫 (著名写手)
有机的微生物大神
- MicEPI: 8
- 应助: 350 (大学生)
- 贵宾: 0.047
- 金币: 3202.9
- 散金: 1849
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 1599
- 在线: 233.4小时
- 虫号: 953932
- 注册: 2010-02-08
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2013-11-12 22:38:18
jiaoxiayoulu
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 38.6
- 散金: 5
- 红花: 1
- 帖子: 96
- 在线: 36.7小时
- 虫号: 2102897
- 注册: 2012-11-02
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2013-12-16 20:44:59
