24小时热门版块排行榜    

查看: 4954  |  回复: 20

sexy758

新虫 (初入文坛)

[求助] BL21大肠杆菌大规模生产初期自溶 已有5人参与

小弟目前在大肠杆菌发规模发酵上遇到了很大的问题:

我们目前采取的是三级发酵,发现三级发酵罐移种后头1~2小时菌种生长正常,但OD600到了2左右就开始溶氧上升,OD下降到灭菌后水平,PH上升,通过镜检发现菌种已经自溶,大约再过8-10小时又能长上来,蛋白也能够正常表达。有时候又能够长得很好,不出现这个问题。

最初在是在三级发酵罐出现这种现象,但最近在一二级种子罐内也开始发生菌体自溶现象,出现问题的发酵液都做过噬菌体平板,没有发现噬菌斑存在。

菌种在LB培养基中生长正常,移入发酵培养基中后就会随机发生自溶现在,我怀疑可能是C/N比不平衡造成,也向大家请教下有没有别的解决思路,小弟在此感谢不尽。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yehuasong

铁虫 (小有名气)

请问楼主的问题有没有解决,我们最近也出现类似的现象
4楼2015-02-06 14:39:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

这不是感染噬菌体,BL21菌株本来就有这种问题
···
8楼2017-02-17 15:04:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

···
17楼2018-03-20 17:47:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

njuwy

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

2楼2013-10-04 17:00:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sexy758

新虫 (初入文坛)

噬菌体平板是按照微生物实验教材上配置的,下层2%LB琼脂,上层是发酵罐中发酵液用大肠杆菌培养过夜的LB发酵液梯度稀释后,按1%的接种量接到1%LB琼脂中,37度培养。
3楼2013-10-04 17:13:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fxchen1990

银虫 (初入文坛)

希望楼主能分享一下解决问题的方法,私聊也行。谢谢,急求

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2015-12-02 11:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们最近2级发酵,发现发酵罐移种后,但OD600到了2~6左右就开始溶氧上升,OD下降,PH上升,并且起少量泡沫,通过镜检发现并没有染菌,大约再过8-15小时又能长上来,蛋白也能表达。有时候不出现这个问题。
有时诱导后不久就起大量泡沫,OD从30左右降到5左右     一直找不到原因
6楼2015-12-22 10:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

likelang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小花木兰 at 2015-12-22 10:38:40
我们最近2级发酵,发现发酵罐移种后,但OD600到了2~6左右就开始溶氧上升,OD下降,PH上升,并且起少量泡沫,通过镜检发现并没有染菌,大约再过8-15小时又能长上来,蛋白也能表达。有时候不出现这个问题。
有时诱导 ...

建议重新构建菌株
7楼2017-02-17 14:46:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxzcyk

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

内容已删除
招你惹你
9楼2017-05-03 16:10:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caoqingqing

新虫 (初入文坛)

请问问题解决了吗?怎么解决的,求解,谢谢!
10楼2017-06-07 11:26:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sexy758 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +7 Liwangman 2026-03-15 7/350 2026-03-18 20:08 by walc
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +9 秋有木北 2026-03-14 9/450 2026-03-18 19:49 by macy2011
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +4 1孙悟空 2026-03-17 4/200 2026-03-18 17:59 by fivewind
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸! 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 314求调剂 +8 无懈可击的巨人 2026-03-12 8/400 2026-03-18 14:50 by haxia
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 268求调剂 +7 好运连绵不绝 2026-03-12 8/400 2026-03-17 20:28 by xilongliang
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么! 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 085600材料与化工求调剂 +5 绪幸与子 2026-03-17 5/250 2026-03-17 16:40 by laoshidan
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 290求调剂 +6 孔志浩 2026-03-12 11/550 2026-03-17 14:41 by 周舟舟77
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨; 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
信息提示
请填处理意见