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BL21大肠杆菌大规模生产初期自溶 已有5人参与
小弟目前在大肠杆菌发规模发酵上遇到了很大的问题:
我们目前采取的是三级发酵,发现三级发酵罐移种后头1~2小时菌种生长正常,但OD600到了2左右就开始溶氧上升,OD下降到灭菌后水平,PH上升,通过镜检发现菌种已经自溶,大约再过8-10小时又能长上来,蛋白也能够正常表达。有时候又能够长得很好,不出现这个问题。
最初在是在三级发酵罐出现这种现象,但最近在一二级种子罐内也开始发生菌体自溶现象,出现问题的发酵液都做过噬菌体平板,没有发现噬菌斑存在。
菌种在LB培养基中生长正常,移入发酵培养基中后就会随机发生自溶现在,我怀疑可能是C/N比不平衡造成,也向大家请教下有没有别的解决思路,小弟在此感谢不尽。 |
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