24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 5052  |  回复: 20

sexy758

新虫 (初入文坛)

[求助] BL21大肠杆菌大规模生产初期自溶 已有5人参与

小弟目前在大肠杆菌发规模发酵上遇到了很大的问题:

我们目前采取的是三级发酵,发现三级发酵罐移种后头1~2小时菌种生长正常,但OD600到了2左右就开始溶氧上升,OD下降到灭菌后水平,PH上升,通过镜检发现菌种已经自溶,大约再过8-10小时又能长上来,蛋白也能够正常表达。有时候又能够长得很好,不出现这个问题。

最初在是在三级发酵罐出现这种现象,但最近在一二级种子罐内也开始发生菌体自溶现象,出现问题的发酵液都做过噬菌体平板,没有发现噬菌斑存在。

菌种在LB培养基中生长正常,移入发酵培养基中后就会随机发生自溶现在,我怀疑可能是C/N比不平衡造成,也向大家请教下有没有别的解决思路,小弟在此感谢不尽。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yehuasong

铁虫 (小有名气)

请问楼主的问题有没有解决,我们最近也出现类似的现象
4楼2015-02-06 14:39:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

这不是感染噬菌体,BL21菌株本来就有这种问题
···
8楼2017-02-17 15:04:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

···
17楼2018-03-20 17:47:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

njuwy

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

2楼2013-10-04 17:00:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sexy758

新虫 (初入文坛)

噬菌体平板是按照微生物实验教材上配置的,下层2%LB琼脂,上层是发酵罐中发酵液用大肠杆菌培养过夜的LB发酵液梯度稀释后,按1%的接种量接到1%LB琼脂中,37度培养。
3楼2013-10-04 17:13:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fxchen1990

银虫 (初入文坛)

希望楼主能分享一下解决问题的方法,私聊也行。谢谢,急求

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2015-12-02 11:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们最近2级发酵,发现发酵罐移种后,但OD600到了2~6左右就开始溶氧上升,OD下降,PH上升,并且起少量泡沫,通过镜检发现并没有染菌,大约再过8-15小时又能长上来,蛋白也能表达。有时候不出现这个问题。
有时诱导后不久就起大量泡沫,OD从30左右降到5左右     一直找不到原因
6楼2015-12-22 10:38:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

likelang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小花木兰 at 2015-12-22 10:38:40
我们最近2级发酵,发现发酵罐移种后,但OD600到了2~6左右就开始溶氧上升,OD下降,PH上升,并且起少量泡沫,通过镜检发现并没有染菌,大约再过8-15小时又能长上来,蛋白也能表达。有时候不出现这个问题。
有时诱导 ...

建议重新构建菌株
7楼2017-02-17 14:46:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxzcyk

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

内容已删除
招你惹你
9楼2017-05-03 16:10:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caoqingqing

新虫 (初入文坛)

请问问题解决了吗?怎么解决的,求解,谢谢!
10楼2017-06-07 11:26:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sexy758 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22专硕求调剂 +9 haoyun上岸 2026-04-11 11/550 2026-04-15 14:47 by elainzaizai
[考研] 291分调剂 +9 上岸小莹加油 2026-04-09 10/500 2026-04-15 13:00 by 西北望—风沙
[考研] 求调剂推荐 +5 小聂爱学习 2026-04-14 5/250 2026-04-15 09:01 by blunt110
[考研] 367求调剂 +11 hffQAQ 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:48 by lhj2009
[考研] 材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组 +21 hualkop 2026-04-12 22/1100 2026-04-14 17:44 by lhj2009
[考研] 化学070300 求调剂 +23 哈哈哈^_^ 2026-04-12 23/1150 2026-04-14 16:30 by zhouxiaoyu
[考研] 290求调剂 +21 luoziheng 2026-04-10 23/1150 2026-04-14 15:49 by zs92450
[考研] 一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂 5+5 chenny174 2026-04-10 37/1850 2026-04-14 07:39 by Abskk
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 0860004 求调剂 309分 +9 Yin DY 2026-04-08 9/450 2026-04-11 22:55 by dongdian1
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 346,工科求调剂 +3 moser233 2026-04-09 3/150 2026-04-11 10:04 by zhq0425
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH(等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 309求调剂 +14 wdhw 2026-04-10 15/750 2026-04-10 21:06 by zhouxiaoyu
[考研] 计算机类求调剂,22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 22408 366分,本科211,一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
信息提示
请填处理意见