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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 50L发酵罐，有关转速、溶氧什么的问题，大家帮忙呀，谢谢
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lanhuaorchid

金虫 (著名写手)

orchid

[求助] 50L发酵罐，有关转速、溶氧什么的问题，大家帮忙呀，谢谢 已有2人参与

重组大肠杆菌培养，高密度发酵，感觉溶氧很重要，不知怎么控制
1）        一般在OD多少的时候诱导，最终会获得很高的菌浓？
2）        一般设置转速与DO偶联么？还是补糖与DO偶联？
3）         尾气之前的滤芯很容易湿，导致灭菌降温过程中压力升高，发酵过程中也会有罐压升高至1.5bar不能放掉，可能是因为发酵过程中的少量泡沫导致滤芯湿掉的，
4）        湿掉的滤芯风干就可以再用了么，或者有什么更好的清洗方法？
5）        50L发酵罐装液40L，一般大家补糖都要补多少？
谢谢
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高密度发酵

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orchid
1楼 2013-09-28 09:01:59
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wangkexin123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

50L发酵罐装40L培养基装的太多了。发酵过程中还要加糖跟补料乳糖，50L发酵罐培养基加到25L就行。诱导的话是od到十加IPTG开始诱导。诱导之前加碱也就是氨水，诱导过后就得加盐酸调节ph值，直到od到40或者50放罐

[ 发自小木虫客户端 ]
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6楼2014-12-08 16:36:58
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郭煜森

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lanhuaorchid: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-10-12 13:46:14
重组大肠杆菌因为不同的基因改造。导致生长速率有明显差异。一般最高具体浓度在16-24个小时左右。也有部分在发酵过程中，一直在缓慢增长。这与补料体积、浓度都有关系。

     溶氧与转速偶联，或者补糖偶联，需要自己摸索参数，看哪是的波动对发酵影响最大。
  
     一般滤芯长时间被水浸润后，会导致过滤效果下降，产生染菌。被发酵液污染后，建议更换滤芯。如非要清洗，可用无水乙醇浸泡，冲洗。因为聚四氟乙烯材料，是耐乙醇的。实践中，检测滤芯的好坏，也是用乙醇加压检测的。

      50L发酵罐，很难装液到40L。在发酵过程中，泡沫太大了。计算发酵液体积，是按照底料量、补糖浓度和体积、转化效率、等等计算出来的。一般50L发酵罐底料体积20-25L，根据不了情况不同，进行控制。
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2楼2013-10-09 13:43:42
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愤怒的番茄

新虫 (小有名气)
50L.你装40有点多了，考虑你的补料，泡沫等因素，还是少装些。你工艺都没摸索，就直接上这么大的罐？？
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3楼2013-11-01 17:08:19
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

装40L，这也太多了吧，一般最多是70%装液量，泡沫多的要减少，后面要补料的更要减少，最后一级过滤器是要经过灭菌的，
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4楼2013-11-02 08:37:16
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