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lanhuaorchid

金虫 (著名写手)

orchid

[求助] 50L发酵罐,有关转速、溶氧什么的问题,大家帮忙呀,谢谢 已有2人参与

重组大肠杆菌培养,高密度发酵,感觉溶氧很重要,不知怎么控制
1)        一般在OD多少的时候诱导,最终会获得很高的菌浓?
2)        一般设置转速与DO偶联么?还是补糖与DO偶联?
3)         尾气之前的滤芯很容易湿,导致灭菌降温过程中压力升高,发酵过程中也会有罐压升高至1.5bar不能放掉,可能是因为发酵过程中的少量泡沫导致滤芯湿掉的,
4)        湿掉的滤芯风干就可以再用了么,或者有什么更好的清洗方法?
5)        50L发酵罐装液40L,一般大家补糖都要补多少?
谢谢
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orchid
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郭煜森

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lanhuaorchid: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-10-12 13:46:14
重组大肠杆菌因为不同的基因改造。导致生长速率有明显差异。一般最高具体浓度在16-24个小时左右。也有部分在发酵过程中,一直在缓慢增长。这与补料体积、浓度都有关系。

     溶氧与转速偶联,或者补糖偶联,需要自己摸索参数,看哪是的波动对发酵影响最大。
  
     一般滤芯长时间被水浸润后,会导致过滤效果下降,产生染菌。被发酵液污染后,建议更换滤芯。如非要清洗,可用无水乙醇浸泡,冲洗。因为聚四氟乙烯材料,是耐乙醇的。实践中,检测滤芯的好坏,也是用乙醇加压检测的。

      50L发酵罐,很难装液到40L。在发酵过程中,泡沫太大了。计算发酵液体积,是按照底料量、补糖浓度和体积、转化效率、等等计算出来的。一般50L发酵罐底料体积20-25L,根据不了情况不同,进行控制。
2楼2013-10-09 13:43:42
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愤怒的番茄

新虫 (小有名气)

50L.你装40有点多了,考虑你的补料,泡沫等因素,还是少装些。你工艺都没摸索,就直接上这么大的罐??
3楼2013-11-01 17:08:19
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wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

装40L,这也太多了吧,一般最多是70%装液量,泡沫多的要减少,后面要补料的更要减少,最后一级过滤器是要经过灭菌的,
4楼2013-11-02 08:37:16
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wt29088

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

装20-30L的体积差不多,这个还要看你的补料是多少。
5楼2014-12-08 11:05:40
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wangkexin123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

50L发酵罐装40L培养基装的太多了。发酵过程中还要加糖跟补料乳糖,50L发酵罐培养基加到25L就行。诱导的话是od到十加IPTG开始诱导。诱导之前加碱也就是氨水,诱导过后就得加盐酸调节ph值,直到od到40或者50放罐

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-12-08 16:36:58
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