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蒽酮比色法测水稻幼苗可溶性糖、淀粉的含量 已有1人参与
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蒽酮比色法测水稻幼苗可溶性糖、淀粉的含量，包括具体的实验步骤，以及注意事项 越详细越好 |
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4楼2013-09-28 19:32:51
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【答案】应助回帖
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蒽酮比色法 1、试剂 (1)．1%蔗糖标准液 将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重，精确称取1.000g。加少量水溶解，移入100ml容量瓶中，加入0.5ml浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度； (2)．100μg/ml蔗糖标准液 精确吸取1%蔗糖标准液1ml加入100ml容量瓶中，加水定容。 (3)．蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中 （4）标准曲线： 管号 0 1 2 3 4 5 100μg/ml蔗糖液（ml） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 水（ml） 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 蔗糖量（μg） 0 20 40 60 80 100 按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。 2、测定方法 可溶性糖的提取（鲜样） 取新鲜甘薯样品，擦净表面污物，剪碎混匀，称取1 g，放入带刻度试管中，加入10mL 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min（提取3次），提取液过滤入100mL容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定容至刻度。 显色测定 ：吸取1ml糖提取液定容至100ml，吸取样品稀释液2ml于20ml刻度试管中（重复2次），按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其光密度、由标准曲线查得待测液的含糖量。 3、结果计算 可溶性糖含量(mg/g)=C*V/( a*m*1000) 式中 C－标准方程求得糖量(μg)；a－吸取样品液体积(ml)；V－提取液量(ml)；m－称样质量（g）。 根据不同作物，因含糖量不同，稀释倍数自己摸索，希望对你有所帮助！ |
2楼2013-09-28 08:12:38
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