应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » taqman 探针PCR信号居高不下什么原因
51/1返回列表
查看: 3443  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

子非鱼花儿开

新虫 (初入文坛)

[求助] taqman 探针PCR信号居高不下什么原因 已有2人参与

最近做taqman 探针法PCR，荧光信号很高，且没有变化曲线。但用sybr green作对照，相同的体系能够跑出来扩增曲线。怀疑是合成的探针淬灭基团没连上，把另外一组没有溶解的干粉送回去检测也没问题。难道是稀释后探针降解了，但稀释是用的高压灭菌PH8.0的TE缓冲液，稀释完就低温保存，才一两个星期的时间应该不至于讲解啊，即使用水也不会那么容易降解的。求大神给指点迷津？非常感谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-09-26 16:14:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子非鱼花儿开

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by love_st at 2013-09-26 16:44:09
估计是探针不给力，连接不上

如果是探针信号低倒好解释，但主要是用别的方法测定发现探针一开始荧光信号就很强，基本没有淬灭。而且相同的序列别人都发nature了
赞一下 回复此楼
5楼2013-09-26 16:51:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

子非鱼花儿开

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2013-09-26 16:19:22
上图上图

图如下
taqman 探针PCR信号居高不下什么原因
sybr green 组


taqman 探针PCR信号居高不下什么原因-1
taqman组


taqman 探针PCR信号居高不下什么原因-2
黄色为sybrgreen，其他为taqman组
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-26 16:42:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
估计是探针不给力，连接不上
赞一下 回复此楼
4楼2013-09-26 16:44:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-27 09:53:46
一个体系无法预想的扩增有很多因素，我一开始就觉得探针可能无法工作，虽然发nature，只是按我的经验所有的序列只能是参考，我从来不直接应用，我更相信自己设计的，所以如果你排除不是探针的问题，那么你要给出你体系其它的应用条件，不然无法分析
赞一下 回复此楼
6楼2013-09-27 08:50:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +9 rare12345 2026-03-18 9/450 2026-03-19 09:46 by 30660438
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +10 秋有木北 2026-03-14 10/500 2026-03-19 05:52 by anny19840123
[考研] 271材料工程求调剂 +5 .6lL 2026-03-18 5/250 2026-03-19 03:07 by 无懈可击111
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +4 Ymlll 2026-03-18 6/300 2026-03-18 22:15 by li123456789.
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +8 Ncdx123456 2026-03-13 9/450 2026-03-18 14:40 by haxia
[考研] 0854可跨调剂，一作一项核心论文五项专利，省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 0703化学调剂 +4 pupcoco 2026-03-17 7/350 2026-03-18 12:14 by djl2006
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +6 困于星晨 2026-03-17 6/300 2026-03-18 10:21 by kkcoco25
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭