24小时热门版块排行榜    

查看: 1771  |  回复: 7

ERIC20081938

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 发酵液除去大分子蛋白

最近在表达一个3kd的小肽,需要用HPLC检测,但是用毕赤酵母表达的发酵液中含有较多的杂蛋白,其中还包括培养基中的蛋白胨和酵母膏,怕对HPLC的C18柱子有伤害,有没有大侠做过类似实验,知道怎样去掉大部分的大分子杂蛋白,还能保留我的小肽呢?不胜感激···
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

Flytothesky```
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tdwinner

木虫 (正式写手)

蛋白浓缩柱试试
2楼2013-09-24 11:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaka1045

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-09-25 16:20:58
超滤试试,或者过中空纤维
3楼2013-09-24 13:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ERIC20081938

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tdwinner at 2013-09-24 11:28:23
蛋白浓缩柱试试

我的小肽只有3kd,没有那么小孔径的柱子呢···
Flytothesky```
4楼2013-09-24 22:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbchenlin

铁虫 (小有名气)

先浓缩再低温沉降,再离心和超滤
5楼2013-10-02 09:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

iamzcd

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

发酵液冷冻干燥浓缩;
浓缩液过G50,你的肽应该在后面的峰出来;
上HPLC前可以先跑个电泳看看大小,小于10000就可以上C18了。
另外既然你的蛋白是表达的,是不是可以过镍柱直接分离?
6楼2013-11-16 10:54:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oldrabbit01

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以先采用纳滤去除大分子蛋白,让你的3kd的肽过滤出来;然后再用反渗透去除低分子成分,保留你的肽。或者先用等电点沉淀、盐析沉淀的方法去除大部分大分子蛋白,再纳滤效果会更好。
7楼2013-11-16 15:22:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qianci2009

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

超滤试试,我们生产600d左右的核苷酸就是先用10kd超滤去除的
8楼2013-11-17 00:29:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ERIC20081938 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 04:47 by LH5NkK5Ud4bh
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-16 04:27 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-16 03:26 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-16 02:35 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:14 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:47 by zNcEhTcH7ihq
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:35 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:25 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[基金申请] 求教各位大神:2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀? +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
请填处理意见