24小时热门版块排行榜    

查看: 1494  |  回复: 7

ERIC20081938

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 发酵液除去大分子蛋白

最近在表达一个3kd的小肽,需要用HPLC检测,但是用毕赤酵母表达的发酵液中含有较多的杂蛋白,其中还包括培养基中的蛋白胨和酵母膏,怕对HPLC的C18柱子有伤害,有没有大侠做过类似实验,知道怎样去掉大部分的大分子杂蛋白,还能保留我的小肽呢?不胜感激···
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

Flytothesky```
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tdwinner

木虫 (正式写手)

蛋白浓缩柱试试
2楼2013-09-24 11:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaka1045

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-09-25 16:20:58
超滤试试,或者过中空纤维
3楼2013-09-24 13:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ERIC20081938

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tdwinner at 2013-09-24 11:28:23
蛋白浓缩柱试试

我的小肽只有3kd,没有那么小孔径的柱子呢···
Flytothesky```
4楼2013-09-24 22:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbchenlin

铁虫 (小有名气)

先浓缩再低温沉降,再离心和超滤
5楼2013-10-02 09:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

iamzcd

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

发酵液冷冻干燥浓缩;
浓缩液过G50,你的肽应该在后面的峰出来;
上HPLC前可以先跑个电泳看看大小,小于10000就可以上C18了。
另外既然你的蛋白是表达的,是不是可以过镍柱直接分离?
6楼2013-11-16 10:54:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oldrabbit01

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以先采用纳滤去除大分子蛋白,让你的3kd的肽过滤出来;然后再用反渗透去除低分子成分,保留你的肽。或者先用等电点沉淀、盐析沉淀的方法去除大部分大分子蛋白,再纳滤效果会更好。
7楼2013-11-16 15:22:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qianci2009

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

超滤试试,我们生产600d左右的核苷酸就是先用10kd超滤去除的
8楼2013-11-17 00:29:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ERIC20081938 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 哈工大计算机刘劼团队招生 +3 hit_aiot 2026-03-01 5/250 2026-03-02 07:48 by 得鹿梦鱼111
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 化工专硕342,一志愿大连理工大学,求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
请填处理意见