应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 发酵液除去大分子蛋白
81/1返回列表
查看: 1767  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ERIC20081938

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 发酵液除去大分子蛋白

最近在表达一个3kd的小肽，需要用HPLC检测，但是用毕赤酵母表达的发酵液中含有较多的杂蛋白，其中还包括培养基中的蛋白胨和酵母膏，怕对HPLC的C18柱子有伤害，有没有大侠做过类似实验，知道怎样去掉大部分的大分子杂蛋白，还能保留我的小肽呢？不胜感激···
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
Flytothesky```
1楼 2013-09-23 20:59:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tdwinner

木虫 (正式写手)
蛋白浓缩柱试试
回复此楼
2楼2013-09-24 11:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaka1045

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-09-25 16:20:58
超滤试试，或者过中空纤维
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-24 13:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ERIC20081938

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tdwinner at 2013-09-24 11:28:23
蛋白浓缩柱试试

我的小肽只有3kd，没有那么小孔径的柱子呢···
赞一下 回复此楼
Flytothesky```
4楼2013-09-24 22:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbchenlin

铁虫 (小有名气)
先浓缩再低温沉降，再离心和超滤
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-02 09:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

iamzcd

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

发酵液冷冻干燥浓缩；
浓缩液过G50，你的肽应该在后面的峰出来；
上HPLC前可以先跑个电泳看看大小，小于10000就可以上C18了。
另外既然你的蛋白是表达的，是不是可以过镍柱直接分离？
赞一下 回复此楼
6楼2013-11-16 10:54:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oldrabbit01

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以先采用纳滤去除大分子蛋白，让你的3kd的肽过滤出来；然后再用反渗透去除低分子成分，保留你的肽。或者先用等电点沉淀、盐析沉淀的方法去除大部分大分子蛋白，再纳滤效果会更好。
赞一下 回复此楼
7楼2013-11-16 15:22:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qianci2009

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

超滤试试，我们生产600d左右的核苷酸就是先用10kd超滤去除的
赞一下 回复此楼
8楼2013-11-17 00:29:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ERIC20081938 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-16 02:38 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:14 by DgNGHc3h5tPl
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:59 by zNcEhTcH7ihq
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 18:59 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 18:47 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:50 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-15 15:14 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 15:02 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:38 by 5BDX0d0WFp7t
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:01 by 5BDX0d0WFp7t
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭