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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 高效液相交流
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JinyHuang

木虫 (小有名气)

[求助] 高效液相交流

我做维生素E的液相实验，固定相是C18 ODS柱，流动相是甲醇：水=98:2，走出来维生素E的出峰时间是24分钟左右，但是因为目标峰有干扰，所以我调整流动相比例为96:4，但是为什么出峰时间反而提前到18分钟？甲醇的洗脱能力不是更强吗？PS：甲醇跟高纯水全部今天刚换过，系统昨天才进过一批VE的样品，不存在污染和系统适应性问题。
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1楼 2013-09-17 21:29:27
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gao1261987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

要多进几针，如果出峰时间一致，才能确定问题
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4楼2013-09-22 10:56:29
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢参与讨论！ 2013-09-23 00:00:18
楼主，应该是还没有平衡好吧，我之前也试过，刚降低了甲醇的比例，反而提前出峰了。平衡时间稍微再长一点。
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2楼2013-09-18 09:29:53
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倾琴安安

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2013-09-23 00:00:01
在进样之前应该将基线平衡好再进样，甲醇的洗脱能力一般，乙腈更强，楼主出现上诉状况，应该让流动相多冲一会。可能是有样品残留。或者同一个条件多做几次，看是否存在偶然因素。
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3楼2013-09-21 16:55:47
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安定的心mary

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2013-09-22 23:59:50
JinyHuang: 金币+2, 谢谢回答！ 2013-09-23 22:10:40
你的色谱系统是反相色谱，即固定相极性小于流动相极性，根据吸附-解吸附原理，极性大的物质先洗脱出来，极性小的后洗脱。从理论上来讲，更换流动相比例后，VE确实应该后出峰，你的提前属于不正常现象，延长出峰时间，再有平衡时间长一些，连续进两针再确定
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追寻自己的梦想，结交有志之友
5楼2013-09-22 16:21:38
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