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JinyHuang

木虫 (小有名气)

[求助] 高效液相交流

我做维生素E的液相实验,固定相是C18 ODS柱,流动相是甲醇:水=98:2,走出来维生素E的出峰时间是24分钟左右,但是因为目标峰有干扰,所以我调整流动相比例为96:4,但是为什么出峰时间反而提前到18分钟?甲醇的洗脱能力不是更强吗?PS:甲醇跟高纯水全部今天刚换过,系统昨天才进过一批VE的样品,不存在污染和系统适应性问题。
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢参与讨论! 2013-09-23 00:00:18
楼主,应该是还没有平衡好吧,我之前也试过,刚降低了甲醇的比例,反而提前出峰了。平衡时间稍微再长一点。
2楼2013-09-18 09:29:53
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倾琴安安

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


karl2100: 金币+1, 谢谢! 2013-09-23 00:00:01
在进样之前应该将基线平衡好再进样,甲醇的洗脱能力一般,乙腈更强,楼主出现上诉状况,应该让流动相多冲一会。可能是有样品残留。或者同一个条件多做几次,看是否存在偶然因素。
3楼2013-09-21 16:55:47
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gao1261987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

要多进几针,如果出峰时间一致,才能确定问题
4楼2013-09-22 10:56:29
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安定的心mary

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
karl2100: 金币+1, 谢谢! 2013-09-22 23:59:50
JinyHuang: 金币+2, 谢谢回答! 2013-09-23 22:10:40
你的色谱系统是反相色谱,即固定相极性小于流动相极性,根据吸附-解吸附原理,极性大的物质先洗脱出来,极性小的后洗脱。从理论上来讲,更换流动相比例后,VE确实应该后出峰,你的提前属于不正常现象,延长出峰时间,再有平衡时间长一些,连续进两针再确定
追寻自己的梦想,结交有志之友
5楼2013-09-22 16:21:38
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超级小钢钻

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你可以将你的流动相甲醇比例再适当下降一点,观察出峰时间是否延迟,如果是,则说明之前属于偶然现象。
6楼2013-09-24 21:28:58
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