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有没有哪位做过无缝克隆的?有些地方不是很明白,想问问
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xy656691
金虫
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有没有哪位做过无缝克隆的?有些地方不是很明白,想问问
试剂盒用的哪个公司的?引物长度是不是要有40多bp,目的片段好扩增吗?实验中要注意什么吗?
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1楼
2013-09-16 14:10:14
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随风飘摇11
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9楼
2015-12-27 10:47:01
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将陈爱喝茶
铁虫
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流
2014-05-04 10:02:15
xy656691: 金币+5
2014-07-30 15:55:04
试剂盒根据酶的质量,价格也不一样,一般要看你的需求了。
引物长是因为你加上了载体两边的同源序列,以便扩出来以后与载体进行同源重组。
目的片段好不好扩增要看你的片段长度以及引物设计的是否合理了。
实验中主要是重组时间不能过长,最好不要超过25分钟。另外注意载体和你的片段连接的地方序列一定要完全同源,这样连接效率才会高。
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3楼
2014-05-03 21:05:42
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水墨蓝
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定个试剂盒 看说明书操作 上次来了个vazyme的销售介绍的有这个,你可以从网上下个他们的说明书,或者直接问他们的技术支持
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4楼
2014-05-04 16:23:35
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于止水
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帖子: 60
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虫号: 2973641
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GBclonart 无缝克隆试剂盒,引物的5端是与载体同源的序列,但3端要保证足够的完全配对的碱基,引物加起来30多到40多,按照说明书来,基本没问题。而且说明书上有需要注意的以及解决办法,还有引物设计示例。
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5楼
2014-07-29 16:32:07
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