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xy656691

金虫 (正式写手)

[交流] 有没有哪位做过无缝克隆的？有些地方不是很明白，想问问

试剂盒用的哪个公司的？引物长度是不是要有40多bp，目的片段好扩增吗？实验中要注意什么吗？

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1楼 2013-09-16 14:10:14

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ellin-leu

金虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 2575.6
帖子: 414
在线: 184.2小时
虫号: 1965202

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

3楼: Originally posted by 将陈爱喝茶 at 2014-05-03 21:05:42
试剂盒根据酶的质量,价格也不一样,一般要看你的需求了。
引物长是因为你加上了载体两边的同源序列，以便扩出来以后与载体进行同源重组。
目的片段好不好扩增要看你的片段长度以及引物设计的是否合理了。
实验中主 ...

请问，为什么重组时间要求这么严格，最好不超过25min？

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7楼2015-12-26 22:07:41

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将陈爱喝茶

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 150.5
帖子: 17
在线: 8.7小时
虫号: 2634429

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-05-04 10:02:15
xy656691: 金币+5 2014-07-30 15:55:04

试剂盒根据酶的质量,价格也不一样,一般要看你的需求了。
引物长是因为你加上了载体两边的同源序列，以便扩出来以后与载体进行同源重组。
目的片段好不好扩增要看你的片段长度以及引物设计的是否合理了。
实验中主要是重组时间不能过长，最好不要超过25分钟。另外注意载体和你的片段连接的地方序列一定要完全同源，这样连接效率才会高。

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3楼2014-05-03 21:05:42

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