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水墨蓝

铁虫 (小有名气)

[求助] CHO细胞G418筛选浓度的确定已有1人参与

看到不少地方说CHO的G418筛选浓度为700-800 μg/ml,确定筛选浓度时需要找出10到14天内杀死细胞的G418浓度,并以高一级的浓度作为筛选浓度,我做这个实验时拉的梯度是500-1200 μg/ml,但是14天过去了,高浓度的孔依然有细胞存活,所以很疑惑是G418浓度不够高吗还是G418本身就不能完完全玩杀死全部的细胞?另外我同时做了另外一个铺板1天半加G418培养的板,细胞存活量明显多于铺板1天的,这是不是意味着G418的作用与细胞浓度有关?大家做的时候有这样的情况出现吗?求大侠们围观解惑!!!
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lihaizhen

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

确定最佳G418浓度时,才第四天400ug/ml及以上浓度基本都死了,这个死的也太快了点。都撑不到第七天啊,这是怎么回事啊?不是说最佳浓度在700-800左右。还有,请问为啥一定要等到第10-14天??只有那时才有克隆形成吗
6楼2015-12-21 16:00:41
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