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hucuiyao

新虫 (小有名气)

[求助] 抗体纯度SDS-PAGE鉴定

我做抗体纯化后鉴定其纯度,SDS-PAGE发现有两条带:重链55KD、轻链25KD,另外在25KD下方还有一条带分子量大约有20多KD吧,想请教一下,第三条是什么呢,为什么会出现第三条带?我查文献都是有两条带啊
急啊,请各位虫友帮忙解释一下,不胜感激啊!
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yichongweiban
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-09-08 20:04:42
除了不完全表达的蛋白质,也可能是在纯化过程中蛋白质发生了水解,你的纯化过程是什么?
4楼2013-09-07 15:06:16
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-09-07 06:26:35
片段吧,或者可能是表达不完全的蛋白。
2楼2013-09-06 10:32:21
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sw85622818

禁虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与,不过回帖更倾向于交流,而不是应助 2013-09-08 20:04:20
本帖内容被屏蔽

3楼2013-09-07 07:36:34
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hucuiyao

新虫 (小有名气)

将多肽与琼脂糖介质偶联制备成抗原亲和纯化层析柱,将所得抗血清与PBS 等量
混合后缓慢上样,待抗原抗体结合后用甘氨酸洗脱缓冲液洗脱,即得到所需纯化抗体,立即
在PBS 中进行4 度透析过夜,隔日进行纯度,浓度和效价测定。

是送公司做的,以上是公司给的报告,公司也没有说明啊,悲催呀
yichongweiban
5楼2013-09-13 17:48:23
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