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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 多糖纯度鉴定
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hxjhxj

新虫 (初入文坛)

[交流] 多糖纯度鉴定 已有3人参与

我用HPLC对多糖进行纯度鉴定。用水做流动相的时候，结果比较差，有两个主峰，还有一些小杂峰，结果看上去很不纯。用叠氮钠做流动相的时候，只有一个峰，结果看上去很纯。我该相信哪个结果呢？造成这样的结果，是什么原因呢？选用哪种流动相，是不是跟我多糖的结构、性质有关系呢？
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1楼 2012-06-15 21:03:31
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buqingyun2

新虫 (初入文坛)
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这个你得多查查文献看有没有相似的多糖，用的HPLC分析方法，如果没有的话，你就得自己摸索，不过大抵不会太差，关键看柱子，流动相，检测器，流速这些都很重要，我们实验室是专门做多糖方向的，如果需要可以再聊
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4楼2012-06-18 14:38:48
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zhh8672

木虫 (小有名气)
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树树8013: 金币+2, 再次鼓励应助。授人玫瑰手有余香，你帮的人可能就在你身边。 2012-06-16 20:23:36
样品是用什么溶解的？是不是仪器还没有稳定就进样了？当然也有你说的这种可能，多糖在纯水中有聚集体的形式存在，会出现不同分子大小的颗粒，在色谱图上也就表现出多个峰的情况，而在一定盐离子强度下，聚集体会分散，形成比较均一的溶液，在色谱图上就表现出一个峰，不知道这个回复和你说的情况是不是相符，你可以验证一下
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hxjhxj
2楼2012-06-16 08:35:59
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hxjhxj

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by zhh8672 at 2012-06-16 08:35:59
样品是用什么溶解的？是不是仪器还没有稳定就进样了？当然也有你说的这种可能，多糖在纯水中有聚集体的形式存在，会出现不同分子大小的颗粒，在色谱图上也就表现出多个峰的情况，而在一定盐离子强度下，聚集体会分散 ...

样品是用流动相溶解的。以水为流动相，就用水溶解的；以叠氮钠为流动相，就用叠氮钠溶解的。仪器应该是稳定了的，我一般是头天晚上就开始跑基线，第二天上午才进样。你说的这种可能性挺有道理的，我再查查资料验证下。谢谢了！
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3楼2012-06-18 09:03:07
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zcczj

铜虫 (正式写手)
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3楼: Originally posted by hxjhxj at 2012-06-18 09:03:07
样品是用流动相溶解的。以水为流动相，就用水溶解的；以叠氮钠为流动相，就用叠氮钠溶解的。仪器应该是稳定了的，我一般是头天晚上就开始跑基线，第二天上午才进样。你说的这种可能性挺有道理的，我再查查资料验证 ...

请问下，想让你看看我的图，也是两个峰，我急着毕业啊。，呜呜呜呜

广西样品 20130409164623.jpg
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慢慢的……
5楼2013-04-11 12:23:04
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zcczj

铜虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by buqingyun2 at 2012-06-18 14:38:48
这个你得多查查文献看有没有相似的多糖，用的HPLC分析方法，如果没有的话，你就得自己摸索，不过大抵不会太差，关键看柱子，流动相，检测器，流速这些都很重要，我们实验室是专门做多糖方向的，如果需要可以再聊

请问下，想让你看看我的图，也是两个峰，

广西样品 20130409164623.jpg
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慢慢的……
6楼2013-04-11 12:23:53
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zcczj

铜虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by buqingyun2 at 2012-06-18 14:38:48
这个你得多查查文献看有没有相似的多糖，用的HPLC分析方法，如果没有的话，你就得自己摸索，不过大抵不会太差，关键看柱子，流动相，检测器，流速这些都很重要，我们实验室是专门做多糖方向的，如果需要可以再聊

请问下，想让你看看我的图，也是两个峰，

广西样品 20130409164623.jpg
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7楼2013-04-11 12:24:05
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zcczj

铜虫 (正式写手)
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2楼: Originally posted by zhh8672 at 2012-06-16 08:35:59
样品是用什么溶解的？是不是仪器还没有稳定就进样了？当然也有你说的这种可能，多糖在纯水中有聚集体的形式存在，会出现不同分子大小的颗粒，在色谱图上也就表现出多个峰的情况，而在一定盐离子强度下，聚集体会分散 ...

请问下，想让你看看我的图，也是两个峰，会不会是您说的多糖在纯水中聚集体存在呢。

广西样品 20130409164623.jpg
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8楼2013-04-11 12:31:55
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zhh8672

木虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by zcczj at 2013-04-11 12:31:55
请问下，想让你看看我的图，也是两个峰，会不会是您说的多糖在纯水中聚集体存在呢。

广西样品 20130409164623.jpg
...

你是用几根柱子分离的，从图中看样品已经分离的不错了，你的这个样品应该是有两个组分，再选择合适的色谱柱应该可以完全分开
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9楼2013-04-12 20:00:11
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zcczj

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9楼: Originally posted by zhh8672 at 2013-04-12 20:00:11
你是用几根柱子分离的，从图中看样品已经分离的不错了，你的这个样品应该是有两个组分，再选择合适的色谱柱应该可以完全分开...

我这个是凝胶柱色谱分离的，
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10楼2013-04-12 22:09:30
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