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hxjhxj

新虫 (初入文坛)

[交流] 多糖纯度鉴定 已有3人参与

我用HPLC对多糖进行纯度鉴定。用水做流动相的时候,结果比较差,有两个主峰,还有一些小杂峰,结果看上去很不纯。用叠氮钠做流动相的时候,只有一个峰,结果看上去很纯。我该相信哪个结果呢?造成这样的结果,是什么原因呢?选用哪种流动相,是不是跟我多糖的结构、性质有关系呢?
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zcczj

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by buqingyun2 at 2012-06-18 14:38:48
这个你得多查查文献看有没有相似的多糖,用的HPLC分析方法,如果没有的话,你就得自己摸索,不过大抵不会太差,关键看柱子,流动相,检测器,流速这些都很重要,我们实验室是专门做多糖方向的,如果需要可以再聊

请问下,想让你看看我的图,也是两个峰,

广西样品 20130409164623.jpg

慢慢的……
7楼2013-04-11 12:24:05
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zhh8672

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
树树8013: 金币+2, 再次鼓励应助。授人玫瑰手有余香,你帮的人可能就在你身边。 2012-06-16 20:23:36
样品是用什么溶解的?是不是仪器还没有稳定就进样了?当然也有你说的这种可能,多糖在纯水中有聚集体的形式存在,会出现不同分子大小的颗粒,在色谱图上也就表现出多个峰的情况,而在一定盐离子强度下,聚集体会分散,形成比较均一的溶液,在色谱图上就表现出一个峰,不知道这个回复和你说的情况是不是相符,你可以验证一下

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2楼2012-06-16 08:35:59
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hxjhxj

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhh8672 at 2012-06-16 08:35:59
样品是用什么溶解的?是不是仪器还没有稳定就进样了?当然也有你说的这种可能,多糖在纯水中有聚集体的形式存在,会出现不同分子大小的颗粒,在色谱图上也就表现出多个峰的情况,而在一定盐离子强度下,聚集体会分散 ...

样品是用流动相溶解的。以水为流动相,就用水溶解的;以叠氮钠为流动相,就用叠氮钠溶解的。仪器应该是稳定了的,我一般是头天晚上就开始跑基线,第二天上午才进样。你说的这种可能性挺有道理的,我再查查资料验证下。谢谢了!
3楼2012-06-18 09:03:07
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buqingyun2

新虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个你得多查查文献看有没有相似的多糖,用的HPLC分析方法,如果没有的话,你就得自己摸索,不过大抵不会太差,关键看柱子,流动相,检测器,流速这些都很重要,我们实验室是专门做多糖方向的,如果需要可以再聊
4楼2012-06-18 14:38:48
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