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wang24新虫 (初入文坛)
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[求助]
验证miRNA靶基因
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| 请问一下，那个miRNA靶基因验证一般是用些什么方法，哪些操作起来方便些，我是刚入手的学生，谢谢大家了！ |
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Miss_M
银虫 (初入文坛)
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【答案】应助回帖
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gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-09-11 16:59:08
gyesang: 回帖置顶 2013-09-11 16:59:10
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-09-11 16:59:08
gyesang: 回帖置顶 2013-09-11 16:59:10
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细胞内加入miRNA会引起靶基因表达产物（蛋白质）的变化 ，因此 可以从蛋白水平上验证靶基因是否被沉默了。常用的方法就是western blot. 当然，也可以从靶基因mRNA水平验证，多用QPCR方法. 2楼说的方法很直接，即在载体构建中加入荧光素酶报告基因，报告miRNA是否产生。但是我认为嘛，miRNA产生了未必就能沉默靶基因了，或者说沉默的效率不高。所以还得看mRNA水平和蛋白水平的情况。 个人意见，仅供楼主参考。 |
3楼2013-09-11 16:45:19
2楼2013-09-05 16:15:03