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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 验证miRNA靶基因
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wang24

新虫 (初入文坛)

[求助] 验证miRNA靶基因

请问一下，那个miRNA靶基因验证一般是用些什么方法，哪些操作起来方便些，我是刚入手的学生，谢谢大家了！
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自己选的路就不要抱怨任何人和事
1楼 2013-09-05 15:23:51
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Miss_M

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2013-09-11 16:59:08
gyesang: 回帖置顶 2013-09-11 16:59:10
细胞内加入miRNA会引起靶基因表达产物（蛋白质）的变化 ，因此 可以从蛋白水平上验证靶基因是否被沉默了。常用的方法就是western blot.

当然，也可以从靶基因mRNA水平验证，多用QPCR方法.

2楼说的方法很直接，即在载体构建中加入荧光素酶报告基因，报告miRNA是否产生。但是我认为嘛，miRNA产生了未必就能沉默靶基因了，或者说沉默的效率不高。所以还得看mRNA水平和蛋白水平的情况。

个人意见，仅供楼主参考。
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3楼2013-09-11 16:45:19
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回头太难

银虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-06 08:26:58
荧光素酶报告基因实验
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2楼2013-09-05 16:15:03
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