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wang24

新虫 (初入文坛)

[求助] 验证miRNA靶基因

请问一下,那个miRNA靶基因验证一般是用些什么方法,哪些操作起来方便些,我是刚入手的学生,谢谢大家了!
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Miss_M

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2013-09-11 16:59:08
gyesang: 回帖置顶 2013-09-11 16:59:10
细胞内加入miRNA会引起靶基因表达产物(蛋白质)的变化 ,因此 可以从蛋白水平上验证靶基因是否被沉默了。常用的方法就是western blot.

当然,也可以从靶基因mRNA水平验证,多用QPCR方法.

2楼说的方法很直接,即在载体构建中加入荧光素酶报告基因,报告miRNA是否产生。但是我认为嘛,miRNA产生了未必就能沉默靶基因了,或者说沉默的效率不高。所以还得看mRNA水平和蛋白水平的情况。

个人意见,仅供楼主参考。
3楼2013-09-11 16:45:19
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回头太难

银虫 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-06 08:26:58
荧光素酶报告基因实验
2楼2013-09-05 16:15:03
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