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raindick1231

铜虫 (小有名气)

[求助] 过高的镁离子浓度对限制性内切酶活性有何影响?

哪位大牛,看过镁离子浓度对限制性内切酶活性影响方面的文章或者有这方面的实验经验?里面有没有提到镁离子浓度过高(十倍浓度)会怎样?
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vicky8685

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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raindick1231: 金币+1 2013-09-04 10:57:00
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-09-04 15:24:45
镁离子浓度过高,酶活性过强,易出现非特异扩增,反应特异性降低,可以确定一个大范围后,按大梯度浓度增加,通过结果确定一个小范围,再按小梯度浓度增加来确定最佳浓度
怪兽
2楼2013-09-04 10:24:16
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raindick1231

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by vicky8685 at 2013-09-04 10:24:16
镁离子浓度过高,酶活性过强,易出现非特异扩增,反应特异性降低,可以确定一个大范围后,按大梯度浓度增加,通过结果确定一个小范围,再按小梯度浓度增加来确定最佳浓度

刚刚看了文献,100倍的镁离子浓度会抑制核酸酶的活性。因为,磷酸基团负电荷被中和,并且导致核酸的二级结构发生改变。
3楼2013-09-04 10:54:34
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