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123菲比寻常

新虫 (初入文坛)

[求助] 急————线虫做PCR-DGGE，GC夹子怎么设计

最近要做线虫pcr-DGGE，可是用没有带gc夹子的引物扩增完跑琼脂糖胶时候有条带，用带有GC夹子的引物扩增就没有条带，之前用带夹子的引物扩出来过，条带也不亮，最近重新pcr时候带夹子的一直扩不出来了，怎么办？？？？？？是夹子有问题吗？我是直接用了其他线虫文献中的夹子，但是引物用的不一样，扩的是18SrDNA上的片段。。。。。急求，线虫的GC夹子怎么设计
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1楼 2013-08-30 17:32:37
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-30 21:39:17
一般不会出现你说的问题，只要GC夹子放在5'，扩增条件没有太大的影响；不知道是不是你的引物本身含有较多的GC，尝试着提高一下退火温度吧~
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致良知
2楼2013-08-30 20:46:29
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