24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2719  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

echochen1017

新虫 (初入文坛)

[求助] 完整6000左右大质粒上定点突变一个基因,用Dpni消化的整个过程

想在6000 左右的大质粒上定点突变一个基因,拟用DpnI消化模板,想请教大神们,这个过程怎么设计?要注意的事项是什么呢?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
本帖内容被屏蔽

6楼2020-11-30 15:42:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

wanggl2004

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-20 11:35:21
直接设计互补引物,用quicchange去突变,pcr产物经电泳确认直接DpnI消化后再回收,然后转化大肠杆菌,挑菌落抽质粒验证
思考是行动的种子!
2楼2013-08-20 10:44:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-20 18:26:22
设计Quickchang突变引物,然后以质粒为模板,进行全质粒PCR,阳性PCR产物取20ul,直接加1ulDpnI消化模板除去模板,灭活后转化宿主细胞。
3楼2013-08-20 16:09:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

echochen1017

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2013-08-20 16:09:41
设计Quickchang突变引物,然后以质粒为模板,进行全质粒PCR,阳性PCR产物取20ul,直接加1ulDpnI消化模板除去模板,灭活后转化宿主细胞。

消化后需要再跑电泳纯化吗?还是消化液直接转化宿主细胞
4楼2013-08-22 10:29:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂求院校招收 +6 鹤鲸鸽 2026-03-28 6/300 2026-03-29 08:15 by fmesaito
[考研] 321求调剂 +7 璞玉~~ 2026-03-25 8/400 2026-03-29 06:41 by 544594351
[考研] 070300化学354求调剂 +4 101次希望 2026-03-28 4/200 2026-03-29 06:19 by 松花缸1201
[考研] 299求调剂 +8 15188958825 2026-03-25 8/400 2026-03-29 01:36 by fmesaito
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-28 3/150 2026-03-28 23:58 by wxiongid
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分,求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 一志愿华理,数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 12/600 2026-03-28 18:15 by AZMK
[考研] 320分,材料与化工专业,求调剂 +9 一定上岸aaa 2026-03-27 13/650 2026-03-28 15:00 by 神马都不懂
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 328求调剂 +7 嗯滴的基本都 2026-03-27 7/350 2026-03-28 04:19 by fmesaito
[有机交流] 高温高压反应求助 10+4 chibby 2026-03-25 4/200 2026-03-27 21:08 by BT20230424
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分,英语已过四六级,六级521,求调剂 +4 美味可乐鸡翅 2026-03-26 4/200 2026-03-27 15:27 by 星空星月
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见