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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于单抗制备
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zhwhhxx

新虫 (小有名气)

[求助] 关于单抗制备

各位高手，本人目前在做小分子单抗方面的实验，实验过程中，发现免疫小鼠后，小鼠的血清中抗体检测呈阳性，但是与所用的小分子物质没有竞争，敬请各位指点迷津
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1楼 2013-08-20 09:27:39
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zhaoxr0311

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个问题就属于跟标准品没有特异性反应，建议改变结构，再次免疫！跟你推荐一下 北京勤邦生物技术有限公司做的小分子抗体挺好的，我之前就是怎么连都不反应，然后交给他们做就出来了。
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2楼2013-08-28 16:40:45
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zhwhhxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaoxr0311 at 2013-08-28 16:40:45
你这个问题就属于跟标准品没有特异性反应，建议改变结构，再次免疫！跟你推荐一下 北京勤邦生物技术有限公司做的小分子抗体挺好的，我之前就是怎么连都不反应，然后交给他们做就出来了。

改变结构，是指改变修饰方法吗？我做的是异喹啉类生物碱的单抗，这个化合物上有一个酚羟基，于是我就想在酚羟基上连一个丁二酸酐，然后再和蛋白偶联。不知大侠还有没有其他可以指点的，比如说，新的偶联方法？
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3楼2013-08-29 14:06:29
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ty10086

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
zhwhhxx: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-31 20:37:24
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3楼: Originally posted by zhwhhxx at 2013-08-29 14:06:29
改变结构，是指改变修饰方法吗？我做的是异喹啉类生物碱的单抗，这个化合物上有一个酚羟基，于是我就想在酚羟基上连一个丁二酸酐，然后再和蛋白偶联。不知大侠还有没有其他可以指点的，比如说，新的偶联方法？...

“小鼠的血清中抗体检测呈阳性，但是与所用的小分子物质没有竞争”
阳性从何而来？
你的结构不合适现在。
回复更多。
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4楼2013-08-29 21:49:49
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zhaoxr0311

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
zhwhhxx: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-31 20:37:39
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4楼: Originally posted by ty10086 at 2013-08-29 21:49:49
“小鼠的血清中抗体检测呈阳性，但是与所用的小分子物质没有竞争”
阳性从何而来？
你的结构不合适现在。
回复更多。...

阳性说明的是抗原本身有免疫原性，能产生抗体。与小分子物质没有竞争就是连接的位点不对，可以试试同时多个位点连接，免疫，会有有抑制情况的，一般情况，不可能你连接的位点就有抑制，这需要经验。其实这也是我在勤邦生物的同学告诉我的，你可以咨询一下他们。
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5楼2013-08-30 08:26:09
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zhwhhxx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhaoxr0311 at 2013-08-30 08:26:09
阳性说明的是抗原本身有免疫原性，能产生抗体。与小分子物质没有竞争就是连接的位点不对，可以试试同时多个位点连接，免疫，会有有抑制情况的，一般情况，不可能你连接的位点就有抑制，这需要经验。其实这也是我在 ...

嗯，谢谢大侠了
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6楼2013-08-31 20:38:10
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一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你偶联的是异喹啉类生物碱小分子，该类小分子的结构应该还算复杂，所以其免疫原性应该是没有太大问题的。
现在需要怀疑的是你到底有没有将小分子成功偶联到载体蛋白？
检测方法：
1. 如果小分子在全波长下有吸收，可以通过全波长扫描来定性确定小分子与载体蛋白是否成功偶联。
很大的可能性是小分子没有偶联到载体蛋白上。
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7楼2013-09-01 16:10:33
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zhwhhxx

新虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-09-01 16:10:33
你偶联的是异喹啉类生物碱小分子，该类小分子的结构应该还算复杂，所以其免疫原性应该是没有太大问题的。
现在需要怀疑的是你到底有没有将小分子成功偶联到载体蛋白？
检测方法：
1. 如果小分子在全波长下有吸收 ...

嗯，是的，已经测过了，好像没有连上，谢谢各位大侠了。
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8楼2013-09-02 10:45:34
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