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zhwhhxx

新虫 (小有名气)

[求助] 关于单抗制备

各位高手,本人目前在做小分子单抗方面的实验,实验过程中,发现免疫小鼠后,小鼠的血清中抗体检测呈阳性,但是与所用的小分子物质没有竞争,敬请各位指点迷津
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zhaoxr0311

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个问题就属于跟标准品没有特异性反应,建议改变结构,再次免疫!跟你推荐一下 北京勤邦生物技术有限公司做的小分子抗体挺好的,我之前就是怎么连都不反应,然后交给他们做就出来了。
2楼2013-08-28 16:40:45
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zhwhhxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaoxr0311 at 2013-08-28 16:40:45
你这个问题就属于跟标准品没有特异性反应,建议改变结构,再次免疫!跟你推荐一下 北京勤邦生物技术有限公司做的小分子抗体挺好的,我之前就是怎么连都不反应,然后交给他们做就出来了。

改变结构,是指改变修饰方法吗?我做的是异喹啉类生物碱的单抗,这个化合物上有一个酚羟基,于是我就想在酚羟基上连一个丁二酸酐,然后再和蛋白偶联。不知大侠还有没有其他可以指点的,比如说,新的偶联方法?
3楼2013-08-29 14:06:29
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ty10086

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★
zhwhhxx: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-31 20:37:24
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhwhhxx at 2013-08-29 14:06:29
改变结构,是指改变修饰方法吗?我做的是异喹啉类生物碱的单抗,这个化合物上有一个酚羟基,于是我就想在酚羟基上连一个丁二酸酐,然后再和蛋白偶联。不知大侠还有没有其他可以指点的,比如说,新的偶联方法?...

“小鼠的血清中抗体检测呈阳性,但是与所用的小分子物质没有竞争”
阳性从何而来?
你的结构不合适现在。
回复更多。
4楼2013-08-29 21:49:49
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zhaoxr0311

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
zhwhhxx: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-31 20:37:39
引用回帖:
4楼: Originally posted by ty10086 at 2013-08-29 21:49:49
“小鼠的血清中抗体检测呈阳性,但是与所用的小分子物质没有竞争”
阳性从何而来?
你的结构不合适现在。
回复更多。...

阳性说明的是抗原本身有免疫原性,能产生抗体。与小分子物质没有竞争就是连接的位点不对,可以试试同时多个位点连接,免疫,会有有抑制情况的,一般情况,不可能你连接的位点就有抑制,这需要经验。其实这也是我在勤邦生物的同学告诉我的,你可以咨询一下他们。
5楼2013-08-30 08:26:09
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zhwhhxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zhaoxr0311 at 2013-08-30 08:26:09
阳性说明的是抗原本身有免疫原性,能产生抗体。与小分子物质没有竞争就是连接的位点不对,可以试试同时多个位点连接,免疫,会有有抑制情况的,一般情况,不可能你连接的位点就有抑制,这需要经验。其实这也是我在 ...

嗯,谢谢大侠了
6楼2013-08-31 20:38:10
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一步一步

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你偶联的是异喹啉类生物碱小分子,该类小分子的结构应该还算复杂,所以其免疫原性应该是没有太大问题的。
现在需要怀疑的是你到底有没有将小分子成功偶联到载体蛋白?
检测方法:
1. 如果小分子在全波长下有吸收,可以通过全波长扫描来定性确定小分子与载体蛋白是否成功偶联。
很大的可能性是小分子没有偶联到载体蛋白上。
7楼2013-09-01 16:10:33
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zhwhhxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-09-01 16:10:33
你偶联的是异喹啉类生物碱小分子,该类小分子的结构应该还算复杂,所以其免疫原性应该是没有太大问题的。
现在需要怀疑的是你到底有没有将小分子成功偶联到载体蛋白?
检测方法:
1. 如果小分子在全波长下有吸收 ...

嗯,是的,已经测过了,好像没有连上,谢谢各位大侠了。
8楼2013-09-02 10:45:34
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