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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Rnase在室温下多久会失活？
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nanqihao1985

银虫 (小有名气)

[求助] Rnase在室温下多久会失活？

最近抽提组织RNA，经常发生降解，想问下Rnase也是一种蛋白，周围环境中的Rnase多久降解失活呢，还是说很难失活？有没有具体的文献研究啊，非常感谢
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做研究要耐的住寂寞
1楼 2013-08-18 15:53:14
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nanqihao1985

银虫 (小有名气)
仍然和很感谢您提供的信息，想问下您有没有这方面的文献啊？？多谢
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做研究要耐的住寂寞
2楼2013-08-18 16:29:01
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xingjiuwcc

木虫 (著名写手)

新手上路

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
RNase很难降解，因而RNA极易降解。。文献查查看吧
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一朝踏上读研路，从此妹子是路人
3楼2013-08-18 17:46:10
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yilian

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
环境中到处都有，而且很难降解，这要看你注意了，做好防护，应该会得到较好的RNA。你可以看看rna提取相关的protocol注意事项。
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4楼2013-08-18 22:39:49
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Abs_Zero

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
RNA如果条件控制的好的话一般也很难降解的。给出建议就是试剂用新的，而且专用，EP管和枪头最好购买，包括水也是建议购买，是在不行就用哇哈哈纯净水试试。自己配的DEPC水一定要在每次使用之前测一下酸碱度，而且DEPC致癌性和EB差不多。之前发生过长时间提取不出来的问题就是配制的DEPC水呈酸性。
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5楼2013-08-18 22:56:17
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没有实际证据，不过我用过4°，1年以上的酶，任然可行！！
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互助互励，共奋共进！！
6楼2013-08-19 07:27:19
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grape_vine

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般大家提取RNA, 都认为是环境里面的RNase会对提取过程造成很大的影响。其实只要你稍微注意一点，外援的一般不回造成很大的影响，原因是提取过程中不论是研磨过程中的液氮还是直接用裂解液，他们都具有非常强的蛋白失火能力，不管什么蛋白在这些条件下基本上会迅速每有活性。因此RNA的明显讲解一般肯定不来自于环境或者器皿上可能存在的微量RNase。 真正的具有极大危险的是细胞内的酶。细胞破碎以后， 如果液氮挥发过快，材料温度回升，或者是磨碎了以后裂解液加少了没有迅速充分的溶解材料，那么内源的大量Rnase可能迅速的就把Rnase给降解了。所以大家更应该注意的是提取过程中，不要出现研磨过程中大的温度变化，也不要多家材料导致裂解液不够，并且材料和裂解液混合要迅速充分，做到了这些一般都不会出现很显著的降解。
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7楼2013-08-19 09:22:01
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