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nanqihao1985银虫 (小有名气)
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[求助]
Rnase在室温下多久会失活？
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| 最近抽提组织RNA，经常发生降解，想问下Rnase也是一种蛋白，周围环境中的Rnase多久降解失活呢，还是说很难失活？有没有具体的文献研究啊，非常感谢 |
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nanqihao1985
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2楼2013-08-18 16:29:01
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6楼2013-08-19 07:27:19
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
| 一般大家提取RNA, 都认为是环境里面的RNase会对提取过程造成很大的影响。其实只要你稍微注意一点，外援的一般不回造成很大的影响，原因是提取过程中不论是研磨过程中的液氮还是直接用裂解液，他们都具有非常强的蛋白失火能力，不管什么蛋白在这些条件下基本上会迅速每有活性。因此RNA的明显讲解一般肯定不来自于环境或者器皿上可能存在的微量RNase。 真正的具有极大危险的是细胞内的酶。细胞破碎以后， 如果液氮挥发过快，材料温度回升，或者是磨碎了以后裂解液加少了没有迅速充分的溶解材料，那么内源的大量Rnase可能迅速的就把Rnase给降解了。所以大家更应该注意的是提取过程中，不要出现研磨过程中大的温度变化，也不要多家材料导致裂解液不够，并且材料和裂解液混合要迅速充分，做到了这些一般都不会出现很显著的降解。 |
7楼2013-08-19 09:22:01
