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上ODS开放柱如何操作
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历经3次硅胶柱上下来的一个馏分（合并了23管），量很多，极性较大（有一定的极性跨度），因硅胶板显示正相再分离的话效果不理想，所以想上反相柱再分分，用的是自己装的ODS开放柱，这里想请教： 1、上样时直接将样品混悬着上到柱体上面吗？这样的话我有2点担心： （1）样品中混有的洗脱不下来的成分（即不溶性成分，怎么洗脱也洗脱不下来，甚至是灰尘）最终会污染柱子。 （2）样品有一定粘性，会堵塞柱子。 2、上样时将样品用甲醇溶解后再上样吗？这样的话我有点担心： （1）样品难以用少量溶剂溶解（无论加热、超声等处理），所以样液体积很大，极不利于分离。 因为样品的成分极性还有一定跨度，ODS薄层板显示有7-9个点，且样品总量较多，我只是想通过此次ODS柱分离，将样品进一步砍段，有幸的话能拿到一两个单体最好。但操作起来实在是让我为难，真正请教各位，尤其是亲自做过ODS开放柱的高手们能指点一二，内心无比感激！ |
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| 首先，ODS也就是所谓的C18反相柱，价格应该不算便宜的，建议不要浪费。上样的话必然是溶液，不能够是混悬液或者有固体不容物存在，可采用离心和过膜的方法去除不溶性成分；这时溶解样品的溶剂应该不能用纯甲醇，不然的话部分样品直接就被冲下来了，起不到分离的作用，要用甲醇水溶解样品（至于比例要看你的流动相是什么比例，最好和流动相吻合，实在不行也不能相差太大）。如果样品极性大的话，用甲醇水应该是可以溶得掉。 |
8楼2013-08-18 13:09:53
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样品溶解，加填料拌匀，柱上层放一张滤纸，将拌匀的样品上柱。冲洗，搜集馏分就可以了。 9楼2013-08-18 14:19:36
10楼2013-08-18 21:55:32
