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求教哪位大侠(看完RT-PCR电泳图)指导我下步该怎么做
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leedan0719
银虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 638.1
散金: 60
红花: 1
帖子: 33
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虫号: 2419177
注册: 2013-04-15
性别: GG
专业: 中药内分泌及代谢药理
[
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求教哪位大侠(看完RT-PCR电泳图)指导我下步该怎么做
求大侠指导我指导我下步怎么做。
详情灾难请您见图
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1楼
2013-08-07 21:55:00
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dyyqc
铜虫
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虫号: 972520
注册: 2010-03-16
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
marker不对吧;杂带太多,先升高退火温度试试,如果还是不行就换引物吧,或者把你的序列切下来连T载体送测序,确定哪条带是你的目的条带。
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5楼
2013-08-08 16:17:04
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Sthunder
木虫
(正式写手)
应助: 130
(高中生)
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散金: 15
红花: 9
帖子: 308
在线: 176.6小时
虫号: 2551016
注册: 2013-07-17
性别: GG
专业: 生物化学
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★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助!
2013-08-08 10:31:28
你应该优化一下你的PCR条件,因为带太多了,而且亮度有些都差不错,不行就重新合成引物,你这个是无法分析结果的!Good luck
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互助互励,共奋共进!!
2楼
2013-08-07 22:15:31
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超然渡陈
金虫
(小有名气)
MolEPI: 4
应助: 50
(小学生)
金币: 1174.9
帖子: 127
在线: 41.7小时
虫号: 1110016
注册: 2010-09-28
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流!
2013-08-08 10:31:36
分析过引物的特异性没有?模板里是否有基因组污染?引物特异性很高的话可以初步尝试提高退火温度。你图上的那个marker条带大小是不是标记反了?只一张图找实验的问题比较难,要把你实验的具体情况描述一下这样才好分析。
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3楼
2013-08-08 10:15:04
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xymouwin
铁杆木虫
(正式写手)
想丫头的笨蛋
应助: 4
(幼儿园)
金币: 17148.5
红花: 1
帖子: 966
在线: 128.3小时
虫号: 493147
注册: 2008-01-10
专业: 肿瘤病因
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
注意3个环节,顺序为:
1)温度 2)循环次数 3)引物。
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4楼
2013-08-08 10:53:25
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