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leedan0719

银虫 (初入文坛)

[求助] 求教哪位大侠(看完RT-PCR电泳图)指导我下步该怎么做

求大侠指导我指导我下步怎么做。
详情灾难请您见图
求教哪位大侠(看完RT-PCR电泳图)指导我下步该怎么做
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xymouwin

铁杆木虫 (正式写手)

想丫头的笨蛋

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
注意3个环节,顺序为:

1)温度 2)循环次数 3)引物。
4楼2013-08-08 10:53:25
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-08 10:31:28
你应该优化一下你的PCR条件,因为带太多了,而且亮度有些都差不错,不行就重新合成引物,你这个是无法分析结果的!Good luck
互助互励,共奋共进!!
2楼2013-08-07 22:15:31
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超然渡陈

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-08 10:31:36
分析过引物的特异性没有?模板里是否有基因组污染?引物特异性很高的话可以初步尝试提高退火温度。你图上的那个marker条带大小是不是标记反了?只一张图找实验的问题比较难,要把你实验的具体情况描述一下这样才好分析。
3楼2013-08-08 10:15:04
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dyyqc

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
marker不对吧;杂带太多,先升高退火温度试试,如果还是不行就换引物吧,或者把你的序列切下来连T载体送测序,确定哪条带是你的目的条带。
5楼2013-08-08 16:17:04
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