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nanamaka

新虫 (初入文坛)

[求助] 转染293T蛋白不表达

我把一段Human DNA克隆到pCS2-myc(myc在N-terminal), 克隆好后转染293T不表达,但测序完全正确,尝试多次始终如此。同一批(都是pCS2-myc)的其他几个都表达了,证明载体没有问题。后来在目的基因后插入GFP,形成融合蛋白,测序正确,转染细胞时有绿色荧光,但用anti-myc检测不到条带,然而,用anti-GFP却能检测到GPF大小的蛋白条带。不清楚是什么原因,请各位高手指教,非常感谢!
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人生若只如初见
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wodehao110

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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会不会抗体坏了,可以换个新的抗体试试。
2楼2013-08-07 21:12:13
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nanamaka

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wodehao110 at 2013-08-07 21:12:13
会不会抗体坏了,可以换个新的抗体试试。

抗体没有问题,同一批有几个表达得很好
人生若只如初见
3楼2013-08-07 21:16:55
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