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土壤纤维素酶的测定
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有没有虫友做过土壤纤维素酶啊，我用的是关松荫的3,5-二硝基水杨酸比色的方法，具体步骤如下： 称取10g土置于50ml三角瓶中，加入20ml 1%羧甲基纤维素溶液，5ml pH5.5磷酸盐缓冲溶液及1.5ml甲苯，将三角瓶放在37℃恒温箱中培养72h。 培养结束后，过滤，并取1ml滤液于25ml容量瓶中，加入3ml 3,5-二硝基水杨酸溶液，放在沸水浴上5min，然后迅速冷却3min。定容，15min后在分光光度计上于540nm波长下比色测定。 现遇到以下问题： 1.羧甲基纤维素（CMC）溶液太粘稠，以至于培养72h后仍难以过滤，很难收集滤液； 2.沸水浴后显色很浅，吸光值很小，平行间差异较大。 因为溶液难以过滤，我采取了高速（10000r/min）离心5min，吸取上清液显色测定，不知道这会不会是影响吸光值的原因。如果影响，那怎么解决难以过滤的问题，可不可以如蒽酮比色法，加入铝钾矾使未分解的羧甲基纤维素沉淀。 有没有测过土壤纤维素酶的虫虫能解答我的疑惑，万分感谢啊 |
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