24小时热门版块排行榜    

查看: 1581  |  回复: 2

fwen2011

铜虫 (小有名气)

[求助] 土壤纤维素酶的测定

有没有虫友做过土壤纤维素酶啊,我用的是关松荫的3,5-二硝基水杨酸比色的方法,具体步骤如下:
         称取10g土置于50ml三角瓶中,加入20ml 1%羧甲基纤维素溶液,5ml pH5.5磷酸盐缓冲溶液及1.5ml甲苯,将三角瓶放在37℃恒温箱中培养72h。
         培养结束后,过滤,并取1ml滤液于25ml容量瓶中,加入3ml 3,5-二硝基水杨酸溶液,放在沸水浴上5min,然后迅速冷却3min。定容,15min后在分光光度计上于540nm波长下比色测定。
现遇到以下问题:
1.羧甲基纤维素(CMC)溶液太粘稠,以至于培养72h后仍难以过滤,很难收集滤液;
2.沸水浴后显色很浅,吸光值很小,平行间差异较大。

因为溶液难以过滤,我采取了高速(10000r/min)离心5min,吸取上清液显色测定,不知道这会不会是影响吸光值的原因。如果影响,那怎么解决难以过滤的问题,可不可以如蒽酮比色法,加入铝钾矾使未分解的羧甲基纤维素沉淀。

有没有测过土壤纤维素酶的虫虫能解答我的疑惑,万分感谢啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjlovesen

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也碰到了这种问题,我是这么解决的,1是离心去上清,我做的时候把葡萄糖放到水中,离心,没有葡萄糖出现在底部,2是颜色浅,离心后取5ml滤液进行比色!
不知道你解决了木有!
做就做最好的
2楼2013-11-08 10:28:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

太阳花很大

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cjlovesen at 2013-11-08 10:28:00
我也碰到了这种问题,我是这么解决的,1是离心去上清,我做的时候把葡萄糖放到水中,离心,没有葡萄糖出现在底部,2是颜色浅,离心后取5ml滤液进行比色!
不知道你解决了木有!

请问,你配置1%羧甲基纤维素溶液是溶于水吗?怎样让它快速溶解?
3楼2018-06-27 19:37:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fwen2011 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +11 documentary 2026-08-10 12/600 2026-08-12 12:42 by kudofaye
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +5 Tide man 2026-08-11 5/250 2026-08-12 09:24 by kangban
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
信息提示
请填处理意见