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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，关于酶活力的抑制试验
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桃心心

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助，关于酶活力的抑制试验

用分光光度计测抑制剂对酶的抑制作用。应该怎样设置空白啊

我用的空白是不加抑制剂，但是抑制剂本身带有颜色，反应体系测出的吸光值总会比空白大
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1楼 2013-08-03 12:47:39
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huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-03 16:14:31
可以测一个 失活酶+抑制剂+加其他成分 的样品，当作对照（空白），当然，酶量很少的话可以用水代替。
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2楼2013-08-03 14:08:53
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破网

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-03 16:14:40
很可能你设置的波长不是很合适，毕竟你测的是底物，颜色有是会有影响，但是应该不会太大。
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go
3楼2013-08-03 15:56:17
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zcm109

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
赞成2楼 空白应该是灭活酶加抑制剂的，不应该是不加抑制剂
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Nothing is impossible!
4楼2013-08-03 23:03:29
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桃心心

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huanghznd at 2013-08-03 14:08:53
可以测一个 失活酶+抑制剂+加其他成分 的样品，当作对照（空白），当然，酶量很少的话可以用水代替。

谢谢。我换成用公式计算了，用两次空白来做。。。但是有些测出负值
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5楼2013-08-04 16:48:44
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huhyyong

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主可以添加HCl使酶失去活性，当然这种方法之后要离心；或者沸水浴加热灭酶活性作为空白组
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6楼2013-08-05 09:16:08
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mmz123250

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上的方法很对。空白组：灭活酶+抑制剂。沸水浴酶活方式简便易行，但需注意操作细节，高温会使水分挥发，加抑制剂后，抑制剂浓度会偏高，颜色会加深。故灭活时需补水。
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7楼2013-08-05 16:30:08
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