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求助,关于酶活力的抑制试验
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桃心心
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]
求助,关于酶活力的抑制试验
用分光光度计测抑制剂对酶的抑制作用。应该怎样设置空白啊
我用的空白是不加抑制剂,但是抑制剂本身带有颜色,反应体系测出的吸光值总会比空白大
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2013-08-03 12:47:39
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huanghznd
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2013-08-03 16:14:31
可以测一个 失活酶+抑制剂+加其他成分 的样品,当作对照(空白),当然,酶量很少的话可以用水代替。
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2楼
2013-08-03 14:08:53
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2013-08-03 16:14:40
很可能你设置的波长不是很合适,毕竟你测的是底物,颜色有是会有影响,但是应该不会太大。
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go
3楼
2013-08-03 15:56:17
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zcm109
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赞成2楼 空白应该是灭活酶加抑制剂的,不应该是不加抑制剂
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Nothing is impossible!
4楼
2013-08-03 23:03:29
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桃心心
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2楼
:
Originally posted by
huanghznd
at 2013-08-03 14:08:53
可以测一个 失活酶+抑制剂+加其他成分 的样品,当作对照(空白),当然,酶量很少的话可以用水代替。
谢谢。我换成用公式计算了,用两次空白来做。。。但是有些测出负值
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5楼
2013-08-04 16:48:44
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huhyyong
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楼主可以添加HCl使酶失去活性,当然这种方法之后要离心;或者沸水浴加热灭酶活性作为空白组
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6楼
2013-08-05 09:16:08
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mmz123250
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楼上的方法很对。空白组:灭活酶+抑制剂。沸水浴酶活方式简便易行,但需注意操作细节,高温会使水分挥发,加抑制剂后,抑制剂浓度会偏高,颜色会加深。故灭活时需补水。
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7楼
2013-08-05 16:30:08
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