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桃心心

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助,关于酶活力的抑制试验

用分光光度计测抑制剂对酶的抑制作用。应该怎样设置空白啊

我用的空白是不加抑制剂,但是抑制剂本身带有颜色,反应体系测出的吸光值总会比空白大
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huanghznd

金虫 (小有名气)

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-03 16:14:31
可以测一个 失活酶+抑制剂+加其他成分 的样品,当作对照(空白),当然,酶量很少的话可以用水代替。
2楼2013-08-03 14:08:53
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破网

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-03 16:14:40
很可能你设置的波长不是很合适,毕竟你测的是底物,颜色有是会有影响,但是应该不会太大。
go
3楼2013-08-03 15:56:17
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zcm109

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
赞成2楼 空白应该是灭活酶加抑制剂的,不应该是不加抑制剂
Nothing is impossible!
4楼2013-08-03 23:03:29
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桃心心

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huanghznd at 2013-08-03 14:08:53
可以测一个 失活酶+抑制剂+加其他成分 的样品,当作对照(空白),当然,酶量很少的话可以用水代替。

谢谢。我换成用公式计算了,用两次空白来做。。。但是有些测出负值
5楼2013-08-04 16:48:44
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huhyyong

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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楼主可以添加HCl使酶失去活性,当然这种方法之后要离心;或者沸水浴加热灭酶活性作为空白组
6楼2013-08-05 09:16:08
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mmz123250

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼上的方法很对。空白组:灭活酶+抑制剂。沸水浴酶活方式简便易行,但需注意操作细节,高温会使水分挥发,加抑制剂后,抑制剂浓度会偏高,颜色会加深。故灭活时需补水。
7楼2013-08-05 16:30:08
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