| 查看: 1792 | 回复: 9 | ||||
[交流]
有关羰基还原酶酶活测定中的几个问题
|
| 小弟做的是NADPH依赖型羰基还原酶，该酶在还原底物的过程中消耗NADPH。文献中测酶活是在A340nm处读到1min内的吸光度的降低的数值。反应总体系为250ul，包括100mmol/L磷酸钾缓冲液PH6.0，底物终浓度1mmol，辅酶NADPH终浓度0.25mmol和适量酶液。具体反映为将缓冲液，底物和辅酶依次加入后30度保温2min，加入适量酶液后读取1min内的A340nm处的吸光值的下降。可是小弟在配置辅酶NADPH时出现了问题，先前是用100mmol/L磷酸钾缓冲液PH6.0配置的，第二天就没有吸光值了，查了相关帖子，说NADPH在磷酸钾缓冲液中不稳定，会氧化，有人说用Tris-HCL配置，可是反应体系是磷酸钾缓冲液PH6.0，不知会有影响么，还有NADPH缓冲液怎么保存，配置成母液么？急急急！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 一切只为明天 |
» 猜你喜欢
同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗
已经有6人回复
-
依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。
已经有6人回复
-
依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。
已经有10人回复
-
天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人）
已经有9人回复
-
有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车
已经有10人回复
-
遇见不省心的家人很难过
已经有24人回复
-
AI 太可怕了，写基金时，提出想法，直接生成的文字比自己想得深远，还有科学性
已经有6人回复
-
酰胺脱乙酰基
已经有13人回复
-
有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福
已经有10人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 环内酰胺的羰基还原
已经有6人回复
- 酵母菌中酶的分离提取
已经有9人回复
- 求助亚硝酸还原酶测定方法
已经有8人回复
- 活性污泥中硝酸还原酶和亚硝酸还原酶测定方法
已经有10人回复
- 不饱和酮的羰基的还原
已经有13人回复
- 羰基还原成氨基
已经有4人回复
- 还原酰胺羰基，保留酯羰基及后处理
已经有46人回复
- 酮(羰基)的还原氨化，做过的帮忙给点经验
已经有24人回复
- 羰基还原酶上DEAEsepharose柱后测酶活、比活力都明显降低，不知道什么原因
已经有5人回复
- 用硼烷将内酰胺羰基还原为亚甲基的问题
已经有31人回复
- 求助关于羰基还原的
已经有5人回复
- 请教还原羰基的试剂
已经有16人回复
- Pd/C可以把羰基还原成烷烃吗
已经有29人回复
- 急求！！植物叶片中硝酸还原酶、谷酰胺合成酶、天门冬酰胺合成酶活性的测定方法
已经有10人回复
- Raney镍能否将羰基还原为醇
已经有5人回复
- 求助 用三乙基硅将羰基还原成亚甲基
已经有6人回复
- 亲和层析blue sepharose 6 Fast Flow 纯化羰基还原酶的问题
已经有5人回复
- 求助羰基的还原
已经有12人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
中国石油大学（华东）吴传德教授团队（国家杰青）2026硕、博招生
+2/204
-
香港科技大学（广州）黄加强课题组智能电池方向博士招聘
+1/81
-
欢迎报考南京农业大学植物环境适应课题组课题组2026级博士生。
+1/76
-
好玩的不敢搞，能搞的不挣钱，能挣钱的我不会做
+1/70
-
坐标浙江宁波，诚征女友
+1/62
-
中国科学院深圳先进技术研究院——招聘博士后
+3/62
-
感谢小木虫的缘分
+1/50
-
同济大学脑机智能团队脑机接口方向招生招聘
+1/35
-
新加坡 南洋理工大学- 智能光子/ 传感 PHD 全奖一名 2026 - 8 月入学
+1/17
-
中国科学技术大学环境系招生
+1/13
-
中南林业科技大学生物质绿色转化与功能材料课题组2026年博士招生
+1/12
-
意大利华人老师University of Padova-全额奖学金博士
+1/9
-
南京医科大学国家级高层次青年人才团队招收博士研究生
+1/8
-
香港中文大学（深圳）陈筱萌 课题组招生公告（博士 / 博后 / 硕士 / RA）
+1/7
-
澳科大招收2026年秋季药剂学/生物材料方向全奖博士研究生（春节不打烊）
+1/7
-
【科研助理招聘-北京理工大学-集成电路与电子学院-国家杰青团队】
+1/4
-
【科研助理招聘-北京理工大学-集成电路与电子学院-国家杰青团队】
+1/4
-
双一流天津工业大学电信学院李鸿强教授招收2026年申请审核制博士3人
+1/3
-
广东工业大学-化学工程专业博士生招生1-2名
+1/1
-
美国密苏里大学“柔性电子”课题组诚聘博士研究生和博士后
+1/1
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
史前五百年: 金币+10 2013-07-22 09:21:50
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
史前五百年: 金币+10 2013-07-22 09:21:50
我们实验室有人做的 一般缓冲液用tris-HCL 效果比钠盐与钾盐的缓冲液好一点 另外辅酶的话一般可以配成母液的 保存在-40度冰箱中 一般没问题的 不过注意用量最好不要长期保存 另外辅酶购买也要注意 有问题的更换厂家试试 因为好多公司的辅酶都是进口分装的 所以在这个过程可能会出现问题 如果不是反应体系的问题 就是辅酶本身的问题 保存不当或者厂家质量等其他原因 我们这边开反应出现过好多次问题 一般都在辅酶的原因  |
史前五百年2楼2013-07-21 18:18:16
3楼2013-07-22 00:05:21
祝福，祝福，美好的未来在向你招手！！！
4楼2013-07-22 00:47:12
5楼2013-07-22 09:21:14
6楼2013-07-23 00:07:32
7楼2013-07-23 08:23:12
8楼2013-07-29 11:33:37
9楼2013-08-26 14:22:31
10楼2013-08-26 21:11:44