| 查看: 1877 | 回复: 9 | ||||
[交流]
有关羰基还原酶酶活测定中的几个问题
|
| 小弟做的是NADPH依赖型羰基还原酶，该酶在还原底物的过程中消耗NADPH。文献中测酶活是在A340nm处读到1min内的吸光度的降低的数值。反应总体系为250ul，包括100mmol/L磷酸钾缓冲液PH6.0，底物终浓度1mmol，辅酶NADPH终浓度0.25mmol和适量酶液。具体反映为将缓冲液，底物和辅酶依次加入后30度保温2min，加入适量酶液后读取1min内的A340nm处的吸光值的下降。可是小弟在配置辅酶NADPH时出现了问题，先前是用100mmol/L磷酸钾缓冲液PH6.0配置的，第二天就没有吸光值了，查了相关帖子，说NADPH在磷酸钾缓冲液中不稳定，会氧化，有人说用Tris-HCL配置，可是反应体系是磷酸钾缓冲液PH6.0，不知会有影响么，还有NADPH缓冲液怎么保存，配置成母液么？急急急！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 一切只为明天 |
» 猜你喜欢
山东省面上项目限额评审
已经有4人回复
-
一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂
已经有5人回复
-
生物学071000 329分求调剂
已经有4人回复
-
一志愿华中科技大学071000，求调剂
已经有4人回复
-
生物学一志愿985，分数349求调剂
已经有4人回复
-
生物学调剂
已经有4人回复
-
求调剂院校信息
已经有4人回复
-
085600材料与化工306
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有10人回复
-
328求调剂，英语六级551，有科研经历
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 环内酰胺的羰基还原
已经有6人回复
- 酵母菌中酶的分离提取
已经有9人回复
- 求助亚硝酸还原酶测定方法
已经有8人回复
- 活性污泥中硝酸还原酶和亚硝酸还原酶测定方法
已经有10人回复
- 不饱和酮的羰基的还原
已经有13人回复
- 羰基还原成氨基
已经有4人回复
- 还原酰胺羰基，保留酯羰基及后处理
已经有46人回复
- 酮(羰基)的还原氨化，做过的帮忙给点经验
已经有24人回复
- 羰基还原酶上DEAEsepharose柱后测酶活、比活力都明显降低，不知道什么原因
已经有5人回复
- 用硼烷将内酰胺羰基还原为亚甲基的问题
已经有31人回复
- 求助关于羰基还原的
已经有5人回复
- 请教还原羰基的试剂
已经有16人回复
- Pd/C可以把羰基还原成烷烃吗
已经有29人回复
- 急求！！植物叶片中硝酸还原酶、谷酰胺合成酶、天门冬酰胺合成酶活性的测定方法
已经有10人回复
- Raney镍能否将羰基还原为醇
已经有5人回复
- 求助 用三乙基硅将羰基还原成亚甲基
已经有6人回复
- 亲和层析blue sepharose 6 Fast Flow 纯化羰基还原酶的问题
已经有5人回复
- 求助羰基的还原
已经有12人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
材料、化学类硕士研究生调剂机会，学硕专硕均可，有意请联系，非诚勿扰！
+1/85
-
中山大学环境材料团队招聘
+1/85
-
招收调剂生，动物医学专业
+1/84
-
双一流南京医科大学招计算机、AI、统计、生物信息等方向26年9月入学博士
+1/81
-
散金币，求基金中标！！
+1/61
-
招收2026年材料与化工专硕调剂，山东省属重点大学，过国家线即可调剂，名额充足
+2/46
-
光学工程学硕调剂信息
+2/42
-
PBAT溶解做成乳液
+1/36
-
0854电子信息调剂，闽南师大光电芯片研发实验室，柯少颖教授课题组，集成电路
+1/35
-
吲哚美辛原料药合成交流
+1/35
-
中国科学院杭州医学研究所覃江江课题组招聘博士后
+1/30
-
2026年黄河科技学院纳米功能材料研究所招聘
+2/16
-
多伦多大学 & Synetic Labs 招博士后/研究员
+1/8
-
【博士招生】武汉科技大学招收材料、化工、环境、冶金类2026年“申请-考核”制博士生
+1/7
-
宁波东方理工大学余鹏课题组2026年上海交大联培博士生、博士后、科研助理招聘
+1/7
-
新加坡国立大学药学系化学生物学课题组招PhD
+1/6
-
26年申博自荐-计算机视觉
+1/5
-
“机械、材料”招生
+1/4
-
125603工业工程与管理调剂
+1/1
-
欢迎加入赣南师范大学先进光电子研究中心
+1/1
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
史前五百年: 金币+10 2013-07-22 09:21:50
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
史前五百年: 金币+10 2013-07-22 09:21:50
我们实验室有人做的 一般缓冲液用tris-HCL 效果比钠盐与钾盐的缓冲液好一点 另外辅酶的话一般可以配成母液的 保存在-40度冰箱中 一般没问题的 不过注意用量最好不要长期保存 另外辅酶购买也要注意 有问题的更换厂家试试 因为好多公司的辅酶都是进口分装的 所以在这个过程可能会出现问题 如果不是反应体系的问题 就是辅酶本身的问题 保存不当或者厂家质量等其他原因 我们这边开反应出现过好多次问题 一般都在辅酶的原因  |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
史前五百年2楼2013-07-21 18:18:16
3楼2013-07-22 00:05:21
祝福，祝福，美好的未来在向你招手！！！
4楼2013-07-22 00:47:12
5楼2013-07-22 09:21:14
6楼2013-07-23 00:07:32
7楼2013-07-23 08:23:12
8楼2013-07-29 11:33:37
9楼2013-08-26 14:22:31
10楼2013-08-26 21:11:44
