| 查看: 1868 | 回复: 9 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
有关羰基还原酶酶活测定中的几个问题
|
||||
| 小弟做的是NADPH依赖型羰基还原酶，该酶在还原底物的过程中消耗NADPH。文献中测酶活是在A340nm处读到1min内的吸光度的降低的数值。反应总体系为250ul，包括100mmol/L磷酸钾缓冲液PH6.0，底物终浓度1mmol，辅酶NADPH终浓度0.25mmol和适量酶液。具体反映为将缓冲液，底物和辅酶依次加入后30度保温2min，加入适量酶液后读取1min内的A340nm处的吸光值的下降。可是小弟在配置辅酶NADPH时出现了问题，先前是用100mmol/L磷酸钾缓冲液PH6.0配置的，第二天就没有吸光值了，查了相关帖子，说NADPH在磷酸钾缓冲液中不稳定，会氧化，有人说用Tris-HCL配置，可是反应体系是磷酸钾缓冲液PH6.0，不知会有影响么，还有NADPH缓冲液怎么保存，配置成母液么？急急急！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 一切只为明天 |
» 猜你喜欢
材料专硕英一数二306
已经有6人回复
-
265求调剂
已经有4人回复
-
265求调剂
已经有7人回复
-
26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线
已经有8人回复
-
281求调剂（0805）
已经有21人回复
-
0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章
已经有20人回复
-
279分求调剂 一志愿211
已经有6人回复
-
085600材料与化工 求调剂
已经有17人回复
-
能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名
已经有13人回复
-
317求调剂
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 环内酰胺的羰基还原
已经有6人回复
- 酵母菌中酶的分离提取
已经有9人回复
- 求助亚硝酸还原酶测定方法
已经有8人回复
- 活性污泥中硝酸还原酶和亚硝酸还原酶测定方法
已经有10人回复
- 不饱和酮的羰基的还原
已经有13人回复
- 羰基还原成氨基
已经有4人回复
- 还原酰胺羰基，保留酯羰基及后处理
已经有46人回复
- 酮(羰基)的还原氨化，做过的帮忙给点经验
已经有24人回复
- 羰基还原酶上DEAEsepharose柱后测酶活、比活力都明显降低，不知道什么原因
已经有5人回复
- 用硼烷将内酰胺羰基还原为亚甲基的问题
已经有31人回复
- 求助关于羰基还原的
已经有5人回复
- 请教还原羰基的试剂
已经有16人回复
- Pd/C可以把羰基还原成烷烃吗
已经有29人回复
- 急求！！植物叶片中硝酸还原酶、谷酰胺合成酶、天门冬酰胺合成酶活性的测定方法
已经有10人回复
- Raney镍能否将羰基还原为醇
已经有5人回复
- 求助 用三乙基硅将羰基还原成亚甲基
已经有6人回复
- 亲和层析blue sepharose 6 Fast Flow 纯化羰基还原酶的问题
已经有5人回复
- 求助羰基的还原
已经有12人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
【技术服务】研究所横向技术开发及服务
+1/98
-
济南大学林秀娟教授招收材料类博士生
+1/86
-
温州大学吕晶晶课题组2026年招生
+1/79
-
有没有在香港的虫友啊
+1/75
-
0854电子信息调剂，闽南师大光电芯片研发实验室，柯少颖教授课题组，集成电路
+1/36
-
2026年重庆工商大学管理科学与工程专业学术硕士招生调剂，风景总在柳暗花明处
+1/35
-
华南师范大学（211）博士招生- 电子、自动化、机械、生物学、物理相关专业
+2/34
-
哈工大郑州高等研究院刘绍琴与查正宝教授课题组诚招合成生物学背景相关的优秀人才加盟
+1/34
-
招硕士调剂生
+2/24
-
重庆文理学院化学与环境工程学院 2026 届硕士研究生调剂通知
+1/15
-
【博士招生】武汉科技大学招收材料、化工、环境、冶金类2026年“申请-考核”制博士生
+1/7
-
招收调剂生 国家重点实验室（广西某师范大学、B区）
+1/7
-
华中科技大学管理学院招聘社会用工（科研助理）1名
+1/6
-
青岛科技大学化工学院院士团队2026年拟招收全日制博士研究生1名
+1/6
-
武汉纺织大学杰青团队招研究生（材料，化学，高分子，化工）
+1/4
-
浙江大学高纯分离团队诚聘博士后
+1/2
-
北京高校副校长团队招收机械类，环境类学硕和专硕
+1/2
-
首次招收资格，招收工科调剂！
+1/1
-
西安交通大学生命学院智能化诊疗装备研究中心2026年博士生招生
+1/1
-
中山大学医学院赵博课题组硕士招生
+1/1
10楼2013-08-26 21:11:44
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
史前五百年: 金币+10 2013-07-22 09:21:50
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
史前五百年: 金币+10 2013-07-22 09:21:50
我们实验室有人做的 一般缓冲液用tris-HCL 效果比钠盐与钾盐的缓冲液好一点 另外辅酶的话一般可以配成母液的 保存在-40度冰箱中 一般没问题的 不过注意用量最好不要长期保存 另外辅酶购买也要注意 有问题的更换厂家试试 因为好多公司的辅酶都是进口分装的 所以在这个过程可能会出现问题 如果不是反应体系的问题 就是辅酶本身的问题 保存不当或者厂家质量等其他原因 我们这边开反应出现过好多次问题 一般都在辅酶的原因  |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
史前五百年2楼2013-07-21 18:18:16
3楼2013-07-22 00:05:21
祝福，祝福，美好的未来在向你招手！！！
4楼2013-07-22 00:47:12
