| 查看: 1916 | 回复: 9 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
有关羰基还原酶酶活测定中的几个问题
|
||||
| 小弟做的是NADPH依赖型羰基还原酶，该酶在还原底物的过程中消耗NADPH。文献中测酶活是在A340nm处读到1min内的吸光度的降低的数值。反应总体系为250ul，包括100mmol/L磷酸钾缓冲液PH6.0，底物终浓度1mmol，辅酶NADPH终浓度0.25mmol和适量酶液。具体反映为将缓冲液，底物和辅酶依次加入后30度保温2min，加入适量酶液后读取1min内的A340nm处的吸光值的下降。可是小弟在配置辅酶NADPH时出现了问题，先前是用100mmol/L磷酸钾缓冲液PH6.0配置的，第二天就没有吸光值了，查了相关帖子，说NADPH在磷酸钾缓冲液中不稳定，会氧化，有人说用Tris-HCL配置，可是反应体系是磷酸钾缓冲液PH6.0，不知会有影响么，还有NADPH缓冲液怎么保存，配置成母液么？急急急！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 一切只为明天 |
» 猜你喜欢
调剂
已经有17人回复
-
347材料专硕求调剂
已经有15人回复
-
求考研材料调剂
已经有3人回复
-
生物学308分求调剂（一志愿华东师大）做过分子实验
已经有6人回复
-
计算机408｜在校多次国家级竞赛获奖｜申请调剂
已经有4人回复
-
388求调剂
已经有8人回复
-
288求调剂
已经有12人回复
-
求调剂
已经有29人回复
-
266调剂
已经有6人回复
-
304求调剂
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 环内酰胺的羰基还原
已经有6人回复
- 酵母菌中酶的分离提取
已经有9人回复
- 求助亚硝酸还原酶测定方法
已经有8人回复
- 活性污泥中硝酸还原酶和亚硝酸还原酶测定方法
已经有10人回复
- 不饱和酮的羰基的还原
已经有13人回复
- 羰基还原成氨基
已经有4人回复
- 还原酰胺羰基，保留酯羰基及后处理
已经有46人回复
- 酮(羰基)的还原氨化，做过的帮忙给点经验
已经有24人回复
- 羰基还原酶上DEAEsepharose柱后测酶活、比活力都明显降低，不知道什么原因
已经有5人回复
- 用硼烷将内酰胺羰基还原为亚甲基的问题
已经有31人回复
- 求助关于羰基还原的
已经有5人回复
- 请教还原羰基的试剂
已经有16人回复
- Pd/C可以把羰基还原成烷烃吗
已经有29人回复
- 急求！！植物叶片中硝酸还原酶、谷酰胺合成酶、天门冬酰胺合成酶活性的测定方法
已经有10人回复
- Raney镍能否将羰基还原为醇
已经有5人回复
- 求助 用三乙基硅将羰基还原成亚甲基
已经有6人回复
- 亲和层析blue sepharose 6 Fast Flow 纯化羰基还原酶的问题
已经有5人回复
- 求助羰基的还原
已经有12人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
四川轻化工大学物理与电子工程学院 2026年硕士研究生调剂公告
+2/114
-
江西师大化学工程学院调剂今晚0点开放！ 缺额100个，速冲！
+1/94
-
西安石油大学新能源学院接收材料类、能源动力类、机械类、计算机类等专业专硕调剂生！
+1/89
-
材料、化学类硕士研究生最后调剂机会，学硕专硕均可，有意请联系，非诚勿扰！
+2/42
-
聊城大学材料科学与工程学院光功能高分子材料课题组招收调剂研究生
+1/41
-
福建理工大学招收环境、化工、能源动力、新能源科学与工程、材料、机械等学科背景
+1/41
-
大同大学物理学专业硕士研究生招收调剂生
+1/35
-
南京地区，有要戴森洗地机吗？仅限自取
+1/35
-
上海应用技术大学姚子建课题组招生，点击就送研究生学历
+1/26
-
浙江衢州，衢州学院化学与材料工程学院招收全体08、部分07、09调剂同学
+1/21
-
青科大接收材料类、化工化学类调剂研究生（须考数学）
+1/18
-
华北理工大学-化学工程学院招收材料/化学/化工/环境专业硕士
+1/17
-
齐鲁工业大学 绿色造纸与资源循环全国重点实验室 招收调剂研究生
+1/11
-
招硕士研究生！招硕士研究生！招硕士研究生！招生专业：化学
+1/11
-
重庆工商大学 教育部研究中心招收化工/环境/材料/石油/机械方向2026年调剂研究生
+1/10
-
同济大学环境学院 肖倩特聘研究员课题组 招聘硕士/博士（长期有效）
+1/10
-
招收2026级公共卫生与预防医学专业（学硕）调剂生1名
+1/10
-
南开大学环境学院 环境微生物方向 2026年博士招生（已招满）
+1/8
-
湖南理工大学化学化工学院，化学、化工、材料与化工专业研究生调剂名额充足
+1/7
-
河南理工大学化学化工学院招收材料、化工类专业调剂研究生
+1/3
祝福，祝福，美好的未来在向你招手！！！
4楼2013-07-22 00:47:12
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
史前五百年: 金币+10 2013-07-22 09:21:50
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
史前五百年: 金币+10 2013-07-22 09:21:50
我们实验室有人做的 一般缓冲液用tris-HCL 效果比钠盐与钾盐的缓冲液好一点 另外辅酶的话一般可以配成母液的 保存在-40度冰箱中 一般没问题的 不过注意用量最好不要长期保存 另外辅酶购买也要注意 有问题的更换厂家试试 因为好多公司的辅酶都是进口分装的 所以在这个过程可能会出现问题 如果不是反应体系的问题 就是辅酶本身的问题 保存不当或者厂家质量等其他原因 我们这边开反应出现过好多次问题 一般都在辅酶的原因  |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
史前五百年2楼2013-07-21 18:18:16
3楼2013-07-22 00:05:21
5楼2013-07-22 09:21:14
