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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

[求助] AFLP选择性扩增条带弥散 已有1人参与

AFLP预扩增效果是不错的,但是选择性扩增条带呈弥撒状,没有条带,选用体系为25ul体系
模板 预扩增稀释20倍 2ul
dNTPS  0.5ul
ECORI 引物1ul
MSEI引物1ul
taq酶0.5ul
超纯水补足25ul
94℃2min

94℃30s
65℃30s(每轮减0.7℃)
72℃80s
14个循环
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55℃30s
72℃80s
23轮
72℃5min
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不卑微的我

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

遇到同样问题,同问
选择对的方向,然后一往无前
2楼2013-07-24 12:58:24
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憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 不卑微的我 at 2013-07-24 12:58:24
遇到同样问题,同问

需要优化下体系,跑下大板试试,能分辨清楚
3楼2013-07-25 15:21:06
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lwlskydy

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主能否提供PCR体系所使用的试剂的浓度呀!
我是刚做AFLP,也还在摸索条件!
戒急用忍
4楼2014-10-24 17:04:39
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