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love04love07

铁虫 (小有名气)

[求助] ChIP抗体选择的问题

最近要做ChIP，用自己的转录因子筛选下游调控的基因。现在正在准备阶段，最初遇到的问题是用什么抗体呢？

我已经连接的标签有GST 、HIS 、TRX，但我同学说他们用GFP的抗体，会不会不同抗体的效率不一样而影响结果？那最好用哪个抗体？麻烦各位给出出主意推荐一下。
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1楼 2013-06-30 19:35:04
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
love04love07(myprayer代发): 金币+1, 回答很好 2013-06-30 21:33:41
love04love07: 金币+17, ★★★★★最佳答案, 谢谢，最后用了flag，因为这个蛋白比较小 2013-10-08 17:08:39
原则上标签不能影响转录因子的结构而导致其功能丧失， 这是ChIP材料最最基本的一点.
如果你所有备选的标签都不影响转录因子的生物功能, 在你提到的那些标签里面我推荐GFP, 因为这个是实验发展最成熟的.
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2楼2013-06-30 21:15:03
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透明的玻璃杯

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-01 08:32:20
有点不清楚的是，既然是CHIP了，因该不会有抗体数量的限制，为什么不用几种抗原性不一的单抗呢？不同抗体的效率是不一样而影响结果，因此在经费许可的条件下，选择几种抗体是有必要的！另，his等标签都会有一些非专一条带的干扰，因此还是谨慎为上。
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皇帝诞生地
3楼2013-07-01 08:24:09
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