| 查看: 1010 | 回复: 2 | |||
Staring2011银虫 (小有名气)
|
[求助]
肽链中氨基酸的检测
|
| 请问要知道一条肽链两端的氨基酸各是什么，应该如何检测？ |
回复此楼» 猜你喜欢
食品工程调剂
已经有4人回复
-
一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业083200
已经有5人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有271人回复
-
广东海洋大学食品科学与工程、生物与医药招收调剂考生
已经有0人回复
-
欢迎调剂滁州学院生物与医药专硕
已经有1人回复
-
086003调剂求助
已经有22人回复
-
生物与医药调剂名额多，专业范围宽食品生物相关的07，08，09，10都可调
已经有15人回复
-
淮北师范大学生物医药还有11个调剂名额和资源环境还有10调剂名额，欢迎大家赶紧调剂！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 20种氨基酸的检测
已经有8人回复
- 检测了 胶原蛋白 明胶的氨基酸 组成 然后发现了很神奇的东西。。。。
已经有11人回复
- 氨基酸检测问题
已经有14人回复
- 如何检测一部分有机体（例如蘑菇）中某种氨基酸含量？
已经有10人回复
- 有关于挥发性盐基氮、氨基酸态氮的检测
已经有4人回复
- 如何确定氨基酸衍生检测VWD检测器的波长转换时间？
已经有9人回复
- GC-MS检测和分析尿液中的氨基酸
已经有12人回复
- PITC即edman法测肽链氮端氨基酸
已经有3人回复
- 无紫外吸收的氨基酸盐酸盐的纯度检测
已经有9人回复
- 【求助】食品中微量氨基酸含量的检测方法有哪些？
已经有4人回复
- 请问用气相色谱法分离检测氨基酸用什么柱子？
已经有2人回复
- 【求助】关于氨基酸类药物检测
已经有3人回复
- 【求助】BOC保护的氨基酸，用什么显色剂检测反应程度啊？
已经有10人回复
志子
至尊木虫 (文坛精英)
- 食品EPI: 1
- 应助: 2847 (讲师)
- 贵宾: 0.743
- 金币: 42456.9
- 散金: 3857
- 红花: 299
- 帖子: 21362
- 在线: 1136.8小时
- 虫号: 2471022
- 注册: 2013-05-19
- 专业: 高分子组装与超分子结构
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
答案仅代表个人疏学，无权威性，有误恳请指正。 1纯化蛋白质：用于序列分析的蛋白质应是分子大小均一，电游呈现一条带具有一定纯度的样品。 2分析蛋白质的氨基酸组成：用酸、碱等将蛋白质肽链水解为游离氨基酸，再用电泳、层析等方法分离、鉴定所有游离氨基酸的种类和含量，现在可用氨基酸自动分析仪来快速测定。 3.测定肽链中N末端和C末端为何种氨基酸；若蛋白质由两条以上肽链组成，通过末端氨基酸的测定还可估计蛋白质中的肽链数目。 ① N末端氨基酸测定：二硝基氟苯、丹磺酰氯都可与末端氨基反应，再用盐酸等将肽链水解，将带有二硝基氟苯或丹磺酰氯的氨基酸水解下来，即可分离鉴定出为何种氨基酸，因丹磺酰氯具强烈荧光更易鉴别。 ② C末端氨基酸测定：用相应的羧肽酶将C末端氨基酸水解下来，因各种羧肽酸水解氨基酶的专一性不同，故可对C末端氨基酸做出鉴定。 4.将链间、链内二硫键打开，否则会阻碍蛋白水解溶剂的作用，常用巯基化合物还原法。 5.选择适当的酶或化学试剂将肽链部分水解成适合作序列分析的小肽段，常用的方法有： ①胰蛋白酶法：水解赖氨酸或精氨酸的羧基形成的肽键，故若蛋白质分子中有4个精氨酸或赖氨酸残基，可得5个肽段。 ②胰凝乳蛋白酶法：水解芳香族氨基酸羧基侧的肽键 ③溴化氰法：水解甲硫氨酸羧基侧的肽键。 6.测定各肽段的氨基酸排列顺序： 一般采用 Edman降解法。 因 PITC(异硫氰酸苯酯)只与N末端氨基酸作用，用冷稀酸将此末端残基水解下来，鉴定为何种氨基酸衍生物，残留的肽段N末端可继续与PITC反应，依次逐个鉴定出氨基酸的排列顺序。 7.多肽链用两种方法分别裂解成几组肽段，并测定每一方法中每一肽段的氨基酸排列顺序，肽段重叠法确定整条肽链的氨基酸顺序，若用两种方法找不出重叠肽段，就需用第三种、第四种方法，直到找出重叠肽段。 8.确定二硫键位置： 用电泳法将拆开二硫键的肽段条带与未拆开二硫键的条带进行对比即可定位二硫键的位置。 如此以来，一个完整蛋白质分子的一级结构即可被测定 |
2楼2013-06-04 22:47:21
Staring2011
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 546.9
- 散金: 5
- 红花: 1
- 帖子: 247
- 在线: 97.8小时
- 虫号: 1544761
- 注册: 2011-12-20
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
3楼2013-06-05 10:11:54
